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乌海脱氢表雄酮ELISA试剂盒(DHEA)检测原理&结果计算

分类:新闻中心 发布时间:1970-01-01 32次浏览

脱氢表雄酮ELISA试剂盒(DHEA)是一种用于定量检测人血清和血浆(EDTA或...

脱氢表雄酮ELISA试剂盒(DHEA)是一种用于定量检测人血清和血浆(EDTA或柠檬酸盐)中脱氢表雄酮(DHEA)的酶联免疫吸附测定。该设备旨在用于诊断具有肾上腺功能减退、男性化、21-羟化酶缺乏症或多毛症迹象的个体。该设备不用于检测肾上腺腺瘤和肾上腺癌。仅用于研究目的。

 

艾美捷脱氢表雄酮ELISA试剂盒(DHEA)【#ALP-11-HEAHU-E01】检测原理:

DHEA ELISA试剂盒是一种基于竞争结合原理的固相酶联免疫吸附测定(ELISA)。微孔板表面涂有一层针对DHEA分子抗原位点的多克隆(兔)抗体。在次孵育过程中,样本中的内源性DHEA与DHEA-辣根过氧化物酶结合物竞争与包被抗体的结合位点。孵育完成后,未结合的结合物被洗去,固相部分再与底物溶液孵育。通过加入终止液停止显色反应,测量生成的黄色产物的吸光度(OD)。颜色的强度与样本中分析物的浓度成反比。通过绘制标准曲线(以OD值为纵轴,标准品浓度为横轴),可以确定未知样本的浓度。

 

所需材料(未提供):

校准的微孔板读数仪(450 nm,参考波长为620至630 nm)

校准的可变精度微量移液管

手动或自动微孔板清洗设备

吸水纸

蒸馏水

计时器

半对数坐标纸或数据处理软件

 

结果计算:

样本浓度可以直接从标准曲线上读取。

对于重复测定,必须取每个标准品、质控品和样本的两个吸光度(OD)值的平均值。如果两个值差异较大,ALPCO建议重新检测样本。

浓度超过更高标准的样本可以用标准0进一步稀释,并按照“检测程序”重新检测,或者报告为>30 ng/mL。计算浓度时,必须考虑稀释倍数。

(例如:1:10稀释:10 µL样本 + 90 µL标准0)

 

自动化方法:

说明书中给出的结果是通过四参数逻辑(4PL)曲线拟合自动计算得出的(4PL Rodbard或4PL Marquardt是方法)。其他数据处理方法可能会得出略有不同的结果。

 

手动方法:

使用半对数坐标纸,通过绘制每个标准品的(平均)OD值与其浓度的关系来构建标准曲线(以OD值为纵轴,浓度为横轴)。通过每个样本的(平均)OD值在标准曲线上确定相应的样本浓度。

典型标准曲线示例

以下数据仅用于演示,不能替代实际检测时生成的数据。

11.png

 

脱氢表雄酮ELISA试剂盒(DHEA)文献参考:

1. Mo Q et al (2006) Dehydroepiandrosterone and its metabolites: differential effects on androgen

receptor trafficking and transcriptional activity. J. Steroid Biochem. Mol. Biol.; 99 (1):50-8

2. Webb SJ et al, (2006). The biological actions of dehydroepiandrosterone involves multiple

receptors. Drug Metabolism Reviews; 38 (1-2): 89-116

3. Chen et al (2005). Direct agonist/antagonist functions of dehydroepiandrosterone.

Endocrinology; 146 (11): 4568-76.

4. Kamrath et al (2013). Androgen synthesis in patients with congenital adrenal hyperplasia due

to 21-hydroxylase deficiency. Horm. Metab. Res.; 45 (2):86-91.

5. Savineau JP et al. (2013). Role of DHEA in cardiovascular diseases. Biochem. Pharmacol; 15;

85(6):7-18-26.

6. Traish et al (2011). DHEA - a precursor steroid or an active hormone in human physiology. J

Sex Med. 8(11):2960-82

7. Rachon D. (2012). Differential diagnosis of hyperandrogenism in women with polycystic ovary

syndrome. Exp. Clin Endocrinol. Diabetes. 120(4): 205-9

8. Sciarra et al (1995). Androgen-secreting adrenal tumors. Minerva Endocrinol. 20(1):63-8

9. Miller WL. (2002). Androgen biosynthesis from cholesterol to DHEA. Mol Cell Endocrinol. 30;

198(1-2): 7-14.

 

https://www.amyjet.com/products/ALP-11-HEAHU-E01.shtml

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