腺病毒是一种无包膜病毒，其衣壳呈二十面体结构，直径为90到100纳米，包含一个双链DNA基因组，基因组大小在26到46 kb之间。重组腺病毒已被开发为基因传递载体，用于重组疫苗和基因治疗应用，包括代谢紊乱和癌症的治疗。

传统上，感染性颗粒通过噬菌斑形成单位（PFU）测定法在培养中测量，该方法根据稀释度计算病毒噬菌斑的数量。这些方法耗时（10-14天），需要较长的感染期，并且存在高度的实验间变异性和受病毒-细胞相互作用的影响。Cell Biolabs的QuickTiter?免疫测定试剂盒利用针对腺病毒六邻体蛋白的抗体，通过免疫细胞化学染色观察感染细胞。六邻体蛋白是腺病毒衣壳中更大且丰富的结构蛋白，它们对称分布以形成衣壳的面。

Cell Biolabs的QuickTiter?免疫测定试剂盒提供了一种快速且完整的系统，用于测定病毒的感染性滴度。该试剂盒提供的试剂足以在24孔板中进行多达100次滴定。与经典的噬菌斑测定法所需的10到14天感染期相比，该试剂盒仅需2天感染期。试剂盒中的六邻体蛋白抗体通过免疫细胞化学识别所有51种腺病毒血清型，只要病毒能够在A549或类似的易感细胞中扩增，就可以与任何腺病毒系统配合使用。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs销售产品QuickTiter 野生型腺病毒滴度免疫试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

检测原理

1. 在24孔板中接种A549细胞  

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2. 准备腺病毒稀释液并感染A549细胞48小时  

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3. 使用抗腺病毒抗体进行免疫细胞化学（ICC）染色  

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4. 计数阳性细胞并计算病毒滴度  

相关产品

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试剂盒组成（蓝冰运输）

1. 抗腺病毒抗体（1000倍稀释）（部件编号51681C）：一支30 ?L的管  

2. 二抗，HRP偶联物（1000倍稀释）（部件编号10902）：一支50 ?L的管  

3. DAB底物（25倍稀释）（部件编号10903）：一支1.5 mL的管  

4. 稀释液（10倍稀释）（部件编号10905）：一瓶4.5 mL  

未提供材料

1. 感兴趣的腺病毒  

2. A549细胞及细胞培养生长培养基  

3. 甲醇  

4. 1% BSA/PBS  

5. H?O?  

6. 光学显微镜  

保存方法

收到后，请将试剂盒中的所有组分保存在4℃。

结果示例

以下图表展示了典型的滴定结果。以下数据仅供参考，不应用于解释实际结果。

图1：野生型Ad5滴定。** 使用纯化的野生型Ad5进行10倍系列稀释后，感染24孔板中的A549细胞48小时。按照检测协议进行抗腺病毒免疫染色。

文献参考：

1. Tatsis N, Ertl HC. (2004) Adenoviruses as vaccine vectors. Mol Ther. 10:616–629.

2. Vannucci L, Lai M, Chiuppesi F, Ceccherini-Nelli L, Pistello M. (2013) Viral vectors: A look back and ahead on gene transfer technology. New Microbiol. 36:1–22.

3. Mittal SK, Ahi YS, Vemula SV. (2016) Xenogenic adenoviral vectors. In: Curiel D,editor. Adenoviral Vectors for Gene Therapy. 2nd ed. San Diego,California: Academic Press; 495–528.

4. Vemula SV, Mittal SK. (2010) Production of adenovirus vectors and their use as a delivery system for influenza vaccines. Expert Opin Biol Ther. 10:1469–1487.

5. Sharma A, Tandon M, Bangari DS, Mittal SK. (2009) Adenoviral vector-based strategies for cancer therapy. Curr Drug Ther. 4:117–138.

6. Bangari DS, Mittal SK. (2006) Development of nonhuman adenoviruses as vaccine vectors. Vaccine. 24:849–862.

7. Bewig B., Schmidt WE (2000) Accelerated titering of adenoviruses. BioTechniques 28:870-873.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。  

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