单纯疱疹病毒（HSV）是一种相对较大的包膜病毒，具有线性双链DNA基因组。HSV主要有两种类型：HSV-1和HSV-2。HSV可引起多种疾病，包括黏膜皮肤感染、中枢神经系统感染，以及偶尔的内脏器官感染。

HSV入侵细胞需要四种病毒糖蛋白（gD、gB、gH和gL）。其中，糖蛋白D（gD）是受体结合蛋白，其与受体的结合被认为能够激活异二聚体gH/gL，从而触发gB介导病毒膜与细胞膜的融合。HSV gD的受体包括nectin-1、单纯疱疹病毒进入介导因子8以及一种改性的肝素硫酸盐。

Cell Biolabs的HSV糖蛋白D（gD）ELISA试剂盒是一种用于检测和定量HSV糖蛋白D的酶联免疫吸附试验试剂盒。该试剂盒的抗体能够识别HSV-1和HSV-2的糖蛋白D，检测灵敏度为313皮克/毫升HSV gD。每套试剂盒提供的试剂足以进行最多96次检测，包括标准曲线和HSV裂解样本。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs销售产品单纯疱疹病毒糖蛋白D(gD)ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

单纯疱疹病毒糖蛋白D(gD)ELISA试剂盒检测原理：

将抗HSV gD单克隆抗体吸附在微量滴定板上。样本或标准品中的HSV gD会与吸附在板上的抗体结合；随后加入FITC标记的抗HSV gD单克隆抗体，与被抗体捕获的HSV gD结合。经过孵育和洗涤步骤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗FITC单克隆抗体，与FITC标记的抗HSV gD单克隆抗体结合。在洗涤步骤中去除未结合的HRP标记的抗FITC抗体，然后向孔中加入与HRP反应的底物溶液。根据样本中HSV gD的含量，会形成相应比例的有色产物。通过加入终止液终止反应，并在450纳米处测量吸光度。使用提供的重组HSV gD标准品制备标准曲线，从而确定样本中HSV gD的浓度。

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试剂盒组成

盒子1（常温运输）  

1. 抗HSV gD抗体包被板（部件号51781B）：一条96孔板。  

2. FITC标记抗HSV gD单克隆抗体（部件号51782C）：一瓶20微升。  

3. 辣根过氧化物酶标记抗FITC单克隆抗体（部件号310811）：一瓶20微升。  

4. 检测稀释液（部件号310804）：一瓶50毫升。  

5. 10倍病毒裂解缓冲液（部件号51693B）：一瓶15毫升，含有200 mM Tris，pH 7.5，1500 mM NaCl，10% Triton X-100，1% SDS。  

6. 10倍洗涤缓冲液（部件号310806）：一瓶100毫升。  

7. 底物溶液（部件号310807）：一瓶12毫升，琥珀色瓶。  

8. 终止液（部件号310808）：一瓶12毫升。  

盒子2（蓝冰运输）  

1. 重组HSV-2 gD标准品（部件号51783D）：一瓶100微升，2微克/毫升重组HSV-2糖蛋白D（Lys26-Tyr310），含有BSA的PBS溶液。

未提供材料

1. HSV样本：纯化病毒或未纯化的病毒上清液  

2. 微量离心机  

3. 10微升至1000微升可调节单通道微量移液器及一次性吸头  

4. 50微升至300微升可调节多通道微量移液器及一次性吸头  

5. 多通道微量移液器储液槽  

6. 能在450纳米处读数的微孔板读数仪（620纳米为可选参考波长）  

保存方法

收到试剂盒后，将HSV-2 gD标准品分装并保存在-20℃，避免反复冻融。其他所有组分保存在4℃。

结果示例

以下图表展示了典型的HSV糖蛋白D（gD）ELISA检测结果。以下数据仅供参考，不应用于解释实际结果。

文献参考：

1. Heldwein EE, Krummenacher C. (2008) Entry of herpesviruses into mammalian cells. Cell Mol Life Sci. 65, 1653–1668.

2. Akhtar J, Shukla D. (2009) Viral entry mechanisms: cellular and viral mediators of herpes simplex virus entry. FEBS J. 276, 7228–7236.

3. Connolly, S. A., Jackson, J. O., Jardetzky, T. S. & Longnecker, R. (2011) Fusing structure and function: a structural view of the herpesvirus entry machinery. Nature reviews. Microbiology 9,369–381.

4. Eisenberg, R. J. et al. (2012) Herpes virus fusion and entry: a story with many characters. Viruses 4, 800–832.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。  

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