漳平Anti-H3K27ac多克隆抗体
产品详情
在兔体内产生的针对组蛋白H3的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽在赖氨酸27（H3K27ac）处乙酰化。
作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience销售产品Anti-H3K27ac多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。
| 产品名称 | 货号 | 详情 |
Anti-H3K27ac多克隆抗体 | BPS-25239 | 查看 |
Anti-H3K27ac多克隆抗体：
克隆性：多克隆
宿主物种/表达系统：兔
纯化方法：亲和纯化
形式：水溶液
配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS缓冲液
浓度：50 ?g/42 ?l
免疫原：合成肽
储存/稳定性
在-80°C下可保存长达2年。分装以避免反复冻融。分装后可在-20°C下保存至少一个月。
染色质免疫沉淀（ChIP）实验结果
使用针对H3K27ac的抗体（产品编号25239）和优化的qPCR引物组合，在HeLa细胞中进行ChIP实验。实验使用了100万细胞的剪切染色质。抗体用量梯度为1、2、5和10 ?g/次ChIP实验，并进行了分析。以2 ?g/IP的IgG作为阴性免疫沉淀对照。定量PCR使用了活性基因ACTB和EIF4A2的启动子引物作为阳性对照，以及非活性基因MYT1和TSH2B的编码区引物作为阴性对照。图1显示了回收率，以输入量的百分比表示（免疫沉淀DNA与输入DNA的相对量，经qPCR分析后得出）。这些结果与H3K27乙酰化富集于活性基因启动子区域的观察结果一致。
ChIP-seq实验结果
使用2 ?g针对H3K27ac的抗体（产品编号25239），在100万HeLaS3细胞的剪切染色质上进行ChIP实验。定量PCR使用了活性基因ACTB和EIF4A2的启动子引物作为阳性对照，以及非活性基因MYT1和MB的编码区引物作为阴性对照（图2A）。随后，免疫沉淀的DNA在Illumina基因组分析仪上进行分析。文库制备、簇生成和测序均按照制造商说明进行。36 bp的标签通过ELAND算法与人类基因组比对。图2B显示了沿完整X染色体的峰分布，以及围绕ACTB和EIF4A2阳性对照基因的两个区域的分布（图2C和D）。
抗体滴度测定
为了测定抗体滴度，使用针对H3K27ac的抗体（产品编号25239）在抗原包被的孔中进行ELISA实验，抗体进行梯度稀释。使用的抗原是含有目标组蛋白修饰的肽段。通过绘制吸光度与抗体稀释度的关系图（图3），估计抗体滴度为1:4000。
点杂交分析
使用针对H3K27ac的抗体（产品编号25239）进行点杂交分析，测试其与其他组蛋白修饰肽段以及未修饰的H3K27序列的交叉反应性。将100至0.2 pmol的相应肽段点在膜上，抗体稀释度为1:25000。图4显示抗体对目标修饰具有高特异性。
Western Blot分析
使用针对H3K27ac的抗体（产品编号25239），对HeLa细胞的全细胞裂解物（40 ?g，泳道1）和组蛋白提取物（15 ?g，泳道2），以及1 ?g的重组组蛋白H2A、H2B、H3和H4（分别对应泳道3、4、5和6）进行Western Blot分析。抗体在含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween中稀释1:1000。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。
免疫荧光分析
HeLa细胞用针对H3K27ac的抗体（产品编号25239）和DAPI进行染色。细胞用4%甲醛固定10分钟，并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100进行封闭。细胞用H3K27ac抗体（左侧）在封闭液中稀释1:500进行免疫荧光标记，随后用与Alexa488偶联的抗兔抗体进行二抗标记。中间图显示了DAPI对细胞核的染色。右侧图显示了两种染色的合并图像。
应用
ChIP/ChIP-seq（1 - 2 ?g/ChIP）
ELISA（1:100）
点杂交（1:25000）
Western Blot（1:1000）
免疫荧光（1:500）
运输温度：-20°C或-80°C
物种反应性：人
备注：每次免疫沉淀的抗体优良用量应由终端用户确定。建议测试1 - 5 ?g/次。
注意事项：避免反复冻融。
科学分类：抗体
监管状态：仅限研究使用
产品数据库：
BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
作为BPS Bioscience在中国的区域代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BPS Bioscience以及客户订制化服务。
Anti-H3K27ac多克隆抗体Anti-H3K27ac多克隆抗体
