中文名称

羟甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）（48次分析）

英文名字

MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit(Fluorometric)(48 assays)

供应商

Epigentek

产品货号

P-1037-48

产品报价

￥6160/48Assays

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背景资料

MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）提供了*化的缓冲液和试剂，运用荧光定量的方法，通过检测微孔板上5-hmC的水平，以定量检测全基因组的DNA羟甲基化水平.而没有甲基化和未甲基化胞嘧啶的结合活性.本试剂盒与MethylFlash DNA羟甲基化定量试剂盒（荧光法）能够 配合，用来同时定量检测DNA的甲基化和羟甲基化水平.
关于5-hmC
5-hmC是近年来在动物组织中发现的，由胞嘧啶修饰而来.5-hmC在表观遗传学上的功能可能与5-甲基化胞嘧啶（5-mC）不同.尽管到现在为止还不确知其功能，有研究者猜测它在调控基因的表达与关闭过程中起着重要的作用.5-mC的发现让我们不得不重新评估DNA甲基信息，也不得不监测人类的健康组织和病理组织之间5-mC相对分布的差异.在Epigentek的MethylFlash技术之前，我们还没有发现任何直接的常规方法来检测5- hmC，以及区分5-hmC和5-mC.
5-hmC 和 5-mC的区别
时下常用的DNA甲基化分析方法包括限制内切酶酶切和亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR和测序，这些技术都不适合用来检测5-hmC，因为它与5-mC事实上很难用这类方法区分开来.为了解决这个问题，Epigentek研制了MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）.本试剂盒提供了一种很经济的方法来检测5-羟甲基化胞嘧啶，并且区分5-hmC， 5-mC， 和 C，使得研究者能够重新评估他们的DNA甲基化信息，也能够在新样品中寻找DNA羟甲基化.本试剂盒有以下优点和特性：
简单易学方便快捷的荧光分析技术.整个检测过程只需要3小时20分钟.
灵敏度高，检测极限为10pg羟甲基化的DNA
高度的专一性，不与甲基化胞嘧啶和非甲基化的胞嘧啶结合.5-hmC被专一地坚持.试剂盒中还提供有适用于定量所有物种羟甲基化DNA的普遍阴性对照和阳性对照.
96孔板模式让您可以根据自己的需要地选择用手工或者高通量.
简单、可靠、检测条件恒定.

产品描述

MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）中含有定量检测全基因组羟甲基化所必需的所有试剂.在检测实验中，DNA被固定在一种有DNA吸附能力的孔上，羟甲基化的片段会被捕获剂以及检测抗体识别，用荧光分光光度计读取在ex=530 +/-20/em=580 +/-20 nm处的荧光强度来定量.羟甲基化的DNA的量与荧光强度值成线性关系，可以通过本试剂盒提供的方程来计算两种不同的羟甲基化DNA样品的相对羟甲基化状态或者通过标准曲线*定量5-mc.基于其工作原理和微孔板模式，本试剂盒可以用于各种物种来源的多种样品形式，包括培养的细胞、新鲜和冷冻的组织、石蜡包埋组织、血浆/血清样品以及体液样品.本试剂盒曾经对来自小鼠大脑和海拉细胞系的样品成功地进行了5-hmC的定量，所得到的结果与用HPLC和LC-MS的方法相当.通过使用本试剂盒，研究者们 在正常人类脑部组织和结肠组织中发现了高丰度的5-hmC.同时，研究结果还显示，正常人类脑部组织和结肠组织中5-hmC分别占总甲基化胞嘧啶（5-mC和5-hmC的总和）的32%和16%.相反，在结肠癌细胞系（HCT116）和宫颈癌细胞系（HeLa）中，5-hmC的比率很低，几乎没有. 该羟甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）内主要产品组份包括：HF1 （10X Wash Buffer） HF2 （Binding Solution） HF3 （Negative Control I， 20 ug/ml） HF4 （Negative Control II， 20 ug/ml） HF5 （Positive Control， 20 ug/ml） HF6 （Capture Antibody， 1000 ug/ml HF7 （Detection Antibody， 400 ug/ml） HF8 （Enhancer Solution） HF9 （Fluoro Developer） HF10 （Fluoro Enhancer） HF11 （Fluoro Dilutor） 8-Well Assay Strips （With Frame） 用户指南手册