
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly ADP-ribose polymerase, PARP)是细胞DNA损伤修复通路中的关键酶家族,其通过催化ADP核糖基化修饰靶蛋白,参与DNA单链断裂修复、染色体重塑及基因组稳定性维持。近年来,PARP抑制剂作为靶向治疗药物在癌症领域取得了突破性进展,而研究PARP活性及其调控机制离不开对其底物的深入理解。其中,PARP底物混合物1(PARP Substrate Cocktail 1)作为一种标准化实验试剂,在基础研究与药物开发中扮演了重要角色。
艾美捷PARP底物混合物1:
货号:BPQ-78366
描述:PARP底物混合物1是一种含有生物素标记和未标记底物(NAD⁺)的混合物。
提供形式:Tris缓冲液溶液。
储存:收到后,请于-80°C保存。
稳定性:在-80°C保存时,产品在解冻后可稳定保存六个月。避免反复冻融。
PARP底物混合物1应用:
适用于使用细胞提取物或纯化蛋白的PARP实验。该混合物已针对以下产品进行了优化:
• PARP 1化学发光实验试剂盒(BPS Bioscience #80551)
• PARP 2化学发光实验试剂盒(BPS Bioscience #80552)
• PARP 3化学发光实验试剂盒(BPS Bioscience #80553)
在其他实验中使用可能需要进一步优化。
应用场景与实验优势
PARP活性定量分析
通过检测ADP核糖聚合物(PAR)的生成量,可评估PARP在不同处理(如DNA损伤剂、抑制剂)下的活性变化。例如,在肿瘤细胞中验证PARP抑制剂(如奥拉帕尼)的效能时,底物混合物1可提供稳定、可重复的反应体系。
药物筛选与开发
药物研发中,PARP底物混合物1常与重组PARP酶及候选化合物库联用,通过检测底物消耗或产物生成速率,快速筛选潜在抑制剂或增强剂。
机制研究
结合CRISPR基因编辑技术或蛋白质互作分析,可研究PARP底物代谢与DNA修复通路(如同源重组修复缺陷)的关联性,揭示合成致死效应的分子基础。
PARP底物混合物1在癌症研究中的应用:
一项针对BRCA1突变型卵巢癌的研究中,科研团队利用PARP底物混合物1评估了PARP-1在不同化疗药物处理后的活性变化。结果显示,顺铂诱导的DNA损伤显著激活PARP-1,而联合使用PARP抑制剂后,PAR链的积累被有效抑制,验证了“合成致死”理论的可行性。该实验的成功依赖于底物混合物1的高信噪比和稳定性。
文献参考:
Gibson, B. A., & Kraus, W. L. (2012). New insights into the molecular and cellular functions of poly(ADP-ribose) and PARPs. Nature Reviews Molecular Cell Biology.
Lord, C. J., & Ashworth, A. (2017). PARP inhibitors: Synthetic lethality in the clinic. Science.
厂商技术手册:PARP Substrate Cocktail 1 (e.g., Merck Millipore, #1168-100).