活性氮中间体（RNI）和活性氧中间体（ROI）共同作用，损伤细胞，并被认为与多种疾病的发生机制有关。RNI是一类由一氧化氮（NO）和超氧阴离子（O??）衍生的分子，分别通过一氧化氮合酶（NOS）和NADPH氧化酶产生。一氧化氮是一种已知的血管疾病、糖尿病、肾脏缺血、动脉粥样硬化、炎症性疾病和癌症的介质。然而，由于其极短的半衰期，直接定量检测NO的生成仍然具有挑战性，且不适合大多数检测系统。因此，测量总NO的常用方法是通过其最终氧化产物——亚硝酸盐（NO??）和硝酸盐（NO??）的总和来实现。

Cell Biolabs的OxiSelect?一氧化氮（亚硝酸盐/硝酸盐）检测试剂盒是一种简单、荧光定量检测方法，通过亚硝酸盐/硝酸盐的测定来定量测量各种样本中的一氧化氮（NO）。首先，样本中的硝酸盐（NO??）通过硝酸盐还原酶转化为亚硝酸盐（NO??）。随后，总亚硝酸盐通过荧光探针DAN（2,3-二氨基萘）进行检测。每套试剂盒提供足够的试剂，可使用96孔微孔板格式进行多达100次检测，包括空白对照、标准品和未知样本。该试剂盒适用于血清、血浆、尿液、唾液、裂解液和培养基（详见样本准备），检测灵敏度约为500 nM（在50 ?L样本体积中）。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs销售产品OxiSelect 体外一氧化氮(亚硝酸盐/硝酸盐)测定试剂盒(荧光法)。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

OxiSelect 体外一氧化氮(亚硝酸盐/硝酸盐)测定试剂盒(荧光法)检测原理：

图：硝酸盐通过硝酸盐还原酶转化为亚硝酸盐（A），随后与荧光探针DAN（2,3-二氨基萘）反应（B）。

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试剂盒组成（运输时使用干冰）

1. 亚硝酸盐标准品（部件编号280201）：1支500 ?L的14 mM亚硝酸钠溶液。  

2. 硝酸盐标准品（部件编号280202）：1支500 ?L的14 mM硝酸钠溶液。  

3. 亚硝酸盐检测试剂缓冲液（部件编号280101）：3支1.4 mL的溶液。  

4. 酶混合液（部件编号280203）：3支1.4 mL的溶液。  

5. 1000X酶辅因子（部件编号280207）：1支20 ?L的棕色瓶装溶液。  

6. 100X DAN荧光探针（部件编号280103）：1支25 ?L的棕色瓶装溶液。  

7. 2X荧光探针稀释液（部件编号280104）：1支1.5 mL的溶液。  

8. 终止液（部件编号280105）：1支1.1 mL的溶液。

未提供材料

1. 去离子水或蒸馏水  

2. PBS（用于样本稀释）  

3. 10 kDa截留分子量超滤装置（用于高蛋白含量样本）  

4. 标准96孔荧光黑色微孔板  

5. 能够在360-365 nm激发波长和430-450 nm发射波长范围内读取的荧光微孔板读取仪

储存条件

将整个试剂盒在-80°C下保存。通过分装避免多次冻融。1000X酶辅因子和100X DAN荧光探针对光敏感，应保存在棕色瓶中。

文献参考：

1. Moncada, S. (1992) Acta Physiol. Scand. 145, 201-227.

2. Nathan, C. (1992) FASEB J. 6, 3051-3064.

3. Schreck, R. and Baeuerle, P.A. (1991) Trends Cell Biol. 1, 39-42.

4. Ignarro, L.J. (1990) Pharmacol. Toxicol. 67, 1-7.

5. Green, L.C., et al. (1982) Anal. Biochem. 126, 131-138.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。  

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