
急性期蛋白是在感染、炎症或创伤后浓度增加的血浆蛋白。1930年,Tillet和Frances在人类中发现了个被识别的急性期蛋白。这个CRP是如此因为其能够影响肺炎链球菌的体细胞C-多糖的沉淀而命名。CRP是一种α-球蛋白,质量为110000至140000道尔顿,由五个相同的亚基组成,它们非共价组装成环状五聚体。它在肝脏中合成,在人体中通常以微量形式存在血清成分低于0.3mg/dL。急性组织损伤后血清水平迅速升高一旦刺激被消除,也会迅速下降。已经提出CRP有助于补体激活,影响吞噬细胞功能并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的调查表明血浆或血清中CRP的定量可以在检测、预后和预后方面提供有价值的信息不仅在人类中监测疾病,而且在伴侣动物和农场畜群中也监测疾病。
艾美捷小鼠C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒(KT-095),用于小鼠血清或血浆中CRP的高灵敏度测量。
艾美捷小鼠C-反应蛋白(CRP)高敏ELISA试剂盒检测原理:
该试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术。在该测定中,样品中的CRP与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。通过洗涤去除未结合的样品蛋白后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗CRP抗体。该HRP偶联的抗体与先前结合的CRP形成复合物。在又一个洗涤步骤之后,通过加入显色底物3,3’,5,5’-TMB来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的量与测试样品中CRP的浓度成比例;因此,在450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。测试样品中CRP的量可以从标准品构建的校准曲线中进行计算,并针对样品稀释进行校正。
艾美捷牛C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒试剂制备:
1.浓缩稀释剂
提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。
2.浓缩洗涤液
提供的洗涤液为20X浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时,精矿中的形成并不罕见。将精矿加热至稀释前30-35°C可溶解晶体。
3.酶抗体结合物浓缩物
通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作共轭溶液量酶抗体缀合物与990µL 1X稀释剂,用于每个测试条。在紧接之前稀释使用和保护光线。混合均匀,但要轻柔。避免起泡。
4.TMB基板溶液
随附随用。
5.微量滴定板
随附随用。打开Microtitlity袋并从袋中取出平板。移除所有将不得用于分析,并将其放回装有干燥剂的袋子中并重新密封。
6.小鼠CRP校准器
将1.0mL蒸馏水或去离子水加入冻干的小鼠CRP校准器中,轻轻混合直至溶解。这个校准器现在的浓度为509.375 ng/mL(重组校准器应等分并冷冻如果打算将来使用)。根据表格,在使用前立即准备鼠标CRP校准器在下面在每一步之间充分混合。避免起泡。
除此之外,Kamiya还有各种不同种属的C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒。