呼吸道合胞病毒（RSV）感染是儿童住院的重要原因，并且是全球1岁以下婴儿死亡的主要原因之一。RSV属于肺炎病毒属，含有一个单链、不分节段的负义RNA基因组，长度约为15,200个核苷酸。病毒颗粒表面有三种蛋白质：小疏水蛋白（SH）、附着蛋白（G）和融合蛋白（F）。G和F蛋白是主要的抗原蛋白。根据G蛋白的序列，RSV被分为A和B两个亚群。

RSV核蛋白（N）对病毒的组装和复制至关重要。它通过包裹整个病毒RNA基因组形成核糖核蛋白复合体，从而实现病毒的包膜化。RSV核蛋白在A和B亚群的RSV分离株中高度保守，氨基酸序列同源性超过95%。

Cell Biolabs的RSV核蛋白ELISA试剂盒是一种用于检测和定量RSV核蛋白的酶免疫分析试剂盒。该ELISA试剂盒的抗体能够识别RSV A型和B型的核蛋白。试剂盒的检测灵敏度为313皮克/毫升RSV核蛋白。每个试剂盒提供的试剂足以进行最多96次检测，包括标准曲线和RSV裂解样本。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs销售产品呼吸道合胞病毒核蛋白ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

呼吸道合胞病毒核蛋白ELISA试剂盒检测原理

检测原理

将抗RSV核蛋白单克隆抗体吸附在微量滴定板上。样本或标准品中的RSV核蛋白会与吸附在板上的抗体结合；加入FITC标记的抗RSV核蛋白多克隆抗体，与被抗体捕获的RSV核蛋白结合。经过孵育和洗涤步骤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗FITC单克隆抗体，与FITC标记的抗RSV核蛋白多克隆抗体结合。在洗涤步骤中去除未结合的HRP标记的抗FITC抗体，然后向孔中加入与HRP反应的底物溶液。根据样本中RSV核蛋白的含量，会形成相应比例的有色产物。通过加入终止液终止反应，并在450纳米处测量吸光度。使用重组RSV核蛋白标准品制备标准曲线，然后确定样本中RSV核蛋白的浓度。

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试剂盒组成

盒子1（常温运输）

1. 抗RSV核蛋白抗体包被板（部件号51711B）：一条96孔板。

2. FITC标记抗RSV核蛋白多克隆抗体（部件号51712C）：一瓶20微升。

3. 辣根过氧化物酶标记抗FITC单克隆抗体（部件号310811）：一瓶20微升。

4. 检测稀释液（部件号310804）：一瓶50毫升。

5. 10倍病毒裂解缓冲液（部件号51693B）：一瓶15毫升，含有200 mM Tris，pH 7.5，1500 mM NaCl，10% Triton X-100，1% SDS。

6. 10倍洗涤缓冲液（部件号310806）：一瓶100毫升。

7. 底物溶液（部件号310807）：一瓶1毫升2，琥珀色瓶。

8. 终止液（部件号310808）：一瓶12毫升。

盒子2（蓝冰运输）

1. 重组RSV核蛋白标准品（部件号51713D）：一瓶100微升，2微克/毫升重组人RSV核蛋白（Met1-Leu391），含有BSA的PBS溶液。

未提供材料

1. RSV样本：纯化病毒或未纯化的病毒上清液

2. 量离心机

3. 10微升至1000微升可调节单通道微量移液器及一次性吸头

4. 50微升至300微升可调节多通道微量移液器及一次性吸头

5. 多通道微量移液器储液槽

6. 能在450纳米处读数的微孔板读数仪（620纳米为可选参考波长）

保存方法

收到试剂盒后，将RSV核蛋白标准品分装并保存在-20℃，避免反复冻融。其他所有组分保存在4℃。

结果示例

以下图表展示了典型的RSV核蛋白ELISA检测结果。仅可将以下数据作为参考，不应用于解释实际结果。

文献参考：

1. Afonso, C. L. et al. (2016) Taxonomy of the order Mononegavirales. Arch. Virol. 161, 2351–2360.

2. Shi, T. et al. (2017) Global, regional, and national disease burden estimates of acute lower respiratory infections due to respiratory syncytial virus in young children in 2015: a systematic review and modelling study. Lancet 390, 946–958.

3. Bhella D., Ralph A., Murphy L. B., Yeo R. P. (2002) Significant differences in nucleocapsid morphology within the Paramyxoviridae. J Gen Virol 83, 1831–1839.

4. Tawar R. G., Duquerroy S., Vonrhein C., Varela P. F., Damier-Piolle L., Castagné N., MacLellan K., Bedouelle H., Bricogne G.. (2009) Crystal structure of a nucleocapsid-like nucleoprotein-RNA complex of respiratory syncytial virus. Science 326, 1279–1283.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。  

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