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武平病毒斑检测试剂盒

产品详情

供货周期 现货 应用领域 化工,生物产业
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs销售产品病毒斑检测试剂盒

噬斑测定法于1952年开发,是个用于定量病毒浓度的方法。该方法由Renato Dulbecco改进,允许手动确定含有具有复制能力的溶菌性病毒颗粒的样本中的噬斑形成单位(PFU)数量。


噬斑测定需要使用对目标病毒易感的培养细胞。细胞首先被接种到一个可以附着和生长的表面上,然后过夜培养以形成完整的单层细胞。随后,将病毒样本进行多次稀释,并将每个稀释度的样本加入到细胞的培养皿或孔中。经过一段孵育期,病毒附着到目标细胞上后,移除接种液。然后,培养物被覆盖一层含有营养物质的培养基,以及一种能够形成凝胶或半固体覆盖层的物质,如琼脂糖或甲基纤维素。进入细胞并复制的感染性病毒颗粒可以触发子代病毒颗粒的释放。凝胶限制了颗粒的运动,使得新产生的病毒只能感染邻近的细胞。当病毒杀死感染的细胞时,死亡(或垂死)的细胞会脱落,从而在细胞单层中形成一个孔洞。这个细胞缺失的区域称为噬斑,表现为生长表面上的圆形斑点。


Cell Biolabs的病毒噬斑测定试剂盒提供了一个准确的系统,用于测定溶菌性病毒的感染性滴度。试剂盒提供的试剂足以在12孔板中进行最多120次滴定实验。


作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs销售产品病毒斑检测试剂盒产品仅用于科研,不可用于临床诊断。

产品名称货号详情
病毒斑检测试剂盒VPK-5191查看


病毒斑检测试剂盒检测原理:

天:在12孔或6孔板中接种细胞  

↓  

第二天:用目标病毒的系列稀释液感染细胞,并添加覆盖培养基。在显微镜下观察噬斑的形成  

↓  

第四天至第十六天:固定和染色细胞  

↓  

计数阳性噬斑并计算病毒滴度  


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试剂盒组成(常温运输)

1. CytoSelect?琼脂粉(部件号113001):一瓶1.2克  

2. 10倍固定液(部件号51911A):一瓶20毫升  

3. 细胞染色液(部件号51912A):一瓶30毫升  


未提供材料

1. 目标细胞和病毒  

2. 2倍细胞培养基和无菌DPBS  

3. 无菌细胞培养级水  

4. 微波炉或加热块  

5. 水浴锅  

6. 显微镜  


保存方法

将所有试剂盒组分保存在室温下。


结果示例

以下图表展示了典型的滴定结果。以下数据仅供参考,不应用于解释实际结果。

病毒斑检测试剂盒

图:流感A型和B型病毒在MDCK细胞中的噬斑测定  

使用不同稀释度的流感A型(A面板)和B型(B面板)病毒培养液感染MDCK细胞72小时。


文献参考:

1. Baer, A. & Kehn-Hall, K. (2014) Viral concentration determination through plaque assays: using traditional and novel overlay systems. J. Vis. Exp. 93, 52065.

2. Wen, Z. et al. (2019) Development and application of a higher throughput RSV plaque assay by immunofluorescent imaging. J. Virol. Methods 263, 88–95.

3. Mendoza, E. J., Manguiat, K., Wood, H. & Drebot, M. (2020) Two detailed plaque assay protocols for the quantification of infectious SARS-CoV-2. Curr. Protoc. Microbiol. 57, cpmc105.

4. Blaho, J. A., Morton, E. R. & Yedowitz, J. C. (2006) Herpes simplex virus: propagation,quantification, and storage. Curr. Protoc. Microbiol. 14, E.1.1–E.1.23.

5. Cruz, D. J. M. & Shin, H.-J. (2007) Application of a focus formation assay for detection and titration of porcine epidemic diarrhea virus. J. Virol. Methods 145, 56–61.


Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈(San Diego),是有名的细胞学试剂品牌,作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。  

    

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