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乌海谷胱甘肽(CHO)GSTp ELISA试剂盒:双抗体夹心法,精准定量

分类:新闻中心 发布时间:1970-01-01 29次浏览

GSTp检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫吸附测定(ELISA),用于定量...

GSTp检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫吸附测定(ELISA),用于定量检测仓鼠(CHO)细胞样本中的谷胱甘肽S-转移酶π(GSTp)。仅供研究使用,不得用于诊断程序。

 

艾美捷谷胱甘肽(CHO)GSTp ELISA试剂盒【#41-GSTHA-E01】检测原理:

在此检测中,样本中的GSTp与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗GSTp抗体发生反应。经洗涤去除未结合的蛋白质后,加入检测抗体,即生物素偶联的抗GSTp抗体,形成复合物。洗涤后,加入辣根过氧化物酶(HRP)偶联的链霉亲和素,形成复合物。再经洗涤后,通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来测定复合物。结合的酶量与样本中GSTp的浓度成正比;因此,450 nm处的吸光度是测试样本中GSTp浓度的量度。可以通过标准曲线(由标准品构建)来估算测试样本中GSTp的量,并根据样本稀释情况进行校正。

 

谷胱甘肽(CHO)GSTp ELISA试剂盒组成:

41.png

试剂盒及其组分的有效期在包装标签上注明。如果按照本试剂盒说明书储存和使用,所有组分在有效期内应保持稳定。

 

所需材料(未提供):

精密移液管(2 µL至1000 µL),用于制备和分装稀释液

试管

喷壶或微孔板清洗/吸引器

蒸馏水或去离子水

能在450 nm处读数的微孔板读数仪

用于制备试剂和缓冲液溶液的各种玻璃器皿

用于样本收集的离心机

计时器

微孔板振荡器

 

样本稀释:

检测要求每个测试样本在使用前进行稀释。每次进行检测时,所有样本都应进行双份检测。推荐的稀释倍数仅为建议。稀释倍数应基于未知样本的预期浓度,使得稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平,在运行整个板之前,强烈建议对一个或两个代表性样本进行系列稀释。在使用前立即稀释样本。

CHO培养提取样本——推荐起始稀释倍数为1:20。要制备样本的1:20稀释液,将15 µL样本转移至285 µL的1X稀释液中。充分混合。

 

结果计算:

从所有孔的测试值中减去平均背景值(标准零的平均吸光度读数)。

对每个标准品的重复读数取平均值,并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来处理数据,构建标准曲线。也可以使用二阶多项式(二次)或其他曲线拟合;然而,它们将提供数据的拟合精度较低。

从标准曲线上估算测试样本值。根据稀释因子进行校正,以得出原始样本中GSTp的浓度。

 

https://www.amyjet.com/products/ALP-41-GSTHA-E01.shtml

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