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闵行SouthernBiotech Annexin V染色方案

分类:新闻中心 发布时间:1970-01-01 36次浏览

Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,它通过细胞外侧...

Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,它通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合,是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。

 

ApoScreen®Annexin V 是一种在大肠杆菌中表达的重组蛋白。细胞结构的一些变化在细胞凋亡过程中发生。一个主要的变化是膜磷脂不对称性的丧失,伴随着磷脂酰丝氨酸的移位(PS)从磷脂双层的内小叶到外表面。Annexin V 是钙依赖性磷脂结合蛋白膜联蛋白家族的成员,对含磷脂酰丝氨酸(PS)的磷脂双层具有高度亲和力。共轭的Annexin V可用于监测细胞膜磷脂不对称性的变化,从而提供了一种检测细胞膜磷脂不对称性的方便工具凋亡细胞。

 

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Annexin V建议的染色方案:

1.在冷PBS中清洗细胞两次

2.在冷1X ApoScreen®中重新使用电池膜联蛋白结合缓冲液(SB目录号10045-01)浓度为1 x 106细胞/mL

3.加100mL细胞悬液至5mL聚苯乙烯圆底管

4.加10m共轭ApoScreen®Annexin V

5.轻轻旋转每根试管,在2-8°C温度下培养15分钟,并避光

6.在不清洗的情况下,添加~380m冷1X ApoScreen®Annexin 结合缓冲液到每根管

7.加10mApoScreen®L7-氨基放线菌素D7-AADSB分类号10042-01)或ApoScreen®碘化丙啶(PISB类别号。

 

Annexin V储存方式:

1.纯化的(UNLBApoScreen®Annexin V 0.1mg纯化的重组蛋白形式从PBS中冻干。储存材料在重构前的-20°C温度下。用1.0毫升的dH2O重新配制。将再造材料储存在2-8°C的温度下。

2.荧光素(FITC)、生物素(BIOT)和菁5CY5ApoScreen®附录V结合物在1.0毫升的溶液中作为100次试验提供ApoScreen®Annexin V 结合缓冲液。在2-8°C下储存。

3.R-藻红蛋白(PE)和别藻蓝蛋白(APCApoScreen®1.0毫升PBS/NaN3中,以100次试验的形式提供膜Annexin V结合物和稳定剂。在2-8°C下储存。不要冷冻!

4.保护荧光色素结合物不受光照。如果按照指示储存,试剂在标签上显示的时间内是稳定的。

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