满城胶原蛋白染色试剂盒
产品详情
天狼星红和快绿是一种用于区分胶原蛋白与其周围物质的染料组合。天狼星红专门绑定[Gly-X-Y]原纤维胶原的螺旋结构，无论胶原类型或种类如何，而Fast Green与非胶原结合蛋白质。通过利用这两种染料的d特特征，hondrex，股份有限公司提供了一种简单的半定量测定试剂盒来测定培养细胞层和组织切片中胶原蛋白和非胶原蛋白的量（1-2）。因为该测定不需要胶原蛋白增溶，可用于测量各种组织中的总胶原蛋白含量（3-7）。
由于天狼星红和快绿分别在540 nm和605 nm处有吸收，因此提取的染料的OD值可用于计算样品的胶原蛋白和非胶原蛋白含量。用于组织切片为10-20的一般组织学研究μm厚，胶原蛋白和非胶原蛋白的检测灵敏度分别大于3μg/切片和50μg/切片。这个试剂盒中的试剂足以对30-50个样本进行染色。
作为Chondrex在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐Chondrex销售产品胶原蛋白染色试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。
| 产品名称 | 货号 | 详情 |
胶原蛋白染色试剂盒 | 9046 | 查看 |
胶原蛋白染色试剂盒：
格式：玻璃载玻片和组织培养板。
检测类型：染料染色。
检测时间：根据样本类型不同而有所变化。
标准范围：胶原蛋白：每切片3 μg
非胶原蛋白质：每切片50 μg
样本数量：每个试剂盒可处理30-50个样本。
样本类型：培养细胞和组织切片。
推荐样本稀释：不适用。
着色剂：不适用（在540和605 nm读取）。
存储：室温可保存12个月。
检测协议
以下样本制备方法为标准协议，因此根据样本类型，可能需要进行优化。
A. 石蜡包埋组织切片
1. 准备石蜡包埋的组织切片（约30-50 mm?，厚度为10-20 μm）。
2. 通过以下步骤去除石蜡：
1） 二甲苯，10分钟
2）二甲苯与乙醇的1:1混合液，10分钟
3）乙醇，10分钟
4）50%乙醇/蒸馏水，5分钟
5）蒸馏水，5分钟
3. 将单独的载玻片转移到培养皿中。
4. 在每个样本上加载0.2-0.3毫升染料溶液，确保w全浸没组织切片，并在室温下孵育30分钟。
**注意：** 为避免染料溶液蒸发，在载玻片下放一块湿滤纸，并用盖子覆盖培养皿。
5. 小心吸去染料溶液。
6. 用0.5毫升蒸馏水反复冲洗染色的组织切片，直到水清澈为止。
**选项：** 这些样本可以在显微镜下观察，而不需进行后续的提取步骤。用乙醇脱水，然后用二甲苯清洗，并在树脂介质中封固。
7. 在每个样本上加载1毫升染料提取缓冲液，并轻轻吸取，直到颜色从组织切片中洗脱出来。
8. 收集洗脱的染料溶液，并在540 nm和605 nm用分光光度计读取OD值。
B. 冷冻组织切片
1. 根据标准方法准备冷冻组织切片（约30-50 mm?，厚度为10-20 μm）。
2. 用1X PBS清洗。
**可选固定步骤（8,9）：** 添加0.5毫升Kahle固定液，w全浸没每个组织切片，在室温下孵育10分钟。
**Kahle固定液配方：**
60毫升蒸馏水
28毫升95-乙醇
10毫升37%甲醛
2毫升冰醋酸
3. 去除固定液，用1X PBS清洗，并将单独的载玻片转移到培养皿中。
4. 在每个样本上加载0.2-0.3毫升染料溶液，确保w全浸没组织切片，并在室温下孵育30分钟。
**注意：** 为避免染料溶液蒸发，在载玻片下放一块湿滤纸，并用盖子覆盖培养皿。
5. 小心吸去染料溶液。
6. 用0.5毫升蒸馏水反复冲洗染色的组织切片，直到水清澈为止。
**选项：** 这些样本可以在显微镜下观察，而不需进行后续的提取步骤。用乙醇脱水，然后用二甲苯清洗，并在树脂介质中封固。
7. 在每个样本上加载1毫升染料提取缓冲液，并轻轻吸取，直到颜色从组织切片中洗脱出来。
8. 收集洗脱的染料溶液，并在540 nm和605 nm用分光光度计读取OD值。
C. 体外培养细胞层
1. 如果计划在进行染料提取步骤之前安装细胞层并用显微镜观察，请在24孔培养板的每个孔底部放置一个消毒的圆形玻璃载玻片。否则，跳过此步骤。
2. 在24孔培养板中培养细胞，直至所需时间。
3. 去除培养基，并用1X PBS清洗孔。
4. 添加0.5毫升Kahle固定液，w全浸没细胞层，在室温下孵育10分钟。
**Kahle固定液配方：**
60毫升蒸馏水
28毫升95-乙醇
10毫升37%甲醛
2毫升冰醋酸
5. 去除固定液，并用1X PBS清洗。
6. 添加0.2-0.3毫升染料溶液，确保w全浸没固定细胞层，并在室温下孵育30分钟。
如果细胞在玻璃载玻片上，请去除载玻片并将其放入培养皿中进行染色。
**注意：** 为避免染料溶液蒸发，在载玻片下放一块湿滤纸，并用盖子覆盖培养皿。
7. 小心吸去染料溶液。
8. 用0.5毫升蒸馏水反复冲洗染色的细胞层，直到水清澈为止。
**选项：** 这些样本可以在显微镜下观察，而不需进行后续的提取步骤。用乙醇脱水，然后用二甲苯清洗，并在树脂介质中封固。
9. 在每个样本上加载1毫升染料提取缓冲液，并轻轻吸取，直到颜色从样本中洗脱出来。
10. 收集洗脱的染料溶液，并在540 nm和605 nm用分光光度计读取OD值。
Chondrex成立于1996年，致力于开发和生产高纯度胶原蛋白、抗胶原蛋白单克隆抗体和多种ELISA试剂盒等产品，为研究人员提供研究类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis ,RA)发病机制和筛选潜在治疗方法所需的工具。Chondrex生产400多种免疫学研究产品，涵盖肾炎、结肠炎和过敏性哮喘等一系列自身免疫性疾病模型。此外，还开发了炎症相关产品，如细菌毒素抗体ELISA、细胞因子检测ELISA等。
作为Chondrex在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Chondrex产品。
胶原蛋白染色试剂盒。胶原蛋白染色试剂盒。
