组蛋白的甲基化和去甲基化分别由组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶动态调控。H3K27二甲基化水平在沉默基因中高于活性基因，表明这种组蛋白修饰与转录抑制相关。

以兔为宿主制备的针对组蛋白H3在赖氨酸27位点二甲基化（H3K27me2）的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience销售产品Anti-H3K27me2多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K27me2多克隆抗体：

克隆性：多克隆

宿主物种/表达系统：兔

纯化方法：亲和纯化

形式：水溶液

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS缓冲液

浓度：50 ?g/68 ?l

免疫原：合成肽

储存/稳定性：在-80°C下可保存长达2年。分装以避免反复冻融。分装后可在-20°C下保存至少一个月。

染色质免疫沉淀（ChIP）实验结果

使用针对H3K27me2的抗体（产品编号25241）和优化的qPCR引物组合，在人HeLa细胞中进行ChIP实验。实验使用了100万细胞的剪切染色质。抗体用量梯度为1、2、5和10 ?g/次ChIP实验，并进行了分析。以2 ?g/IP的IgG作为阴性免疫沉淀对照。定量PCR使用了活性基因GAPDH和EIF4A2的启动子引物作为阴性对照，以及非活性基因HBB的启动子和非活性基因MYOD1的编码区引物作为阳性对照。

抗体滴度测定

为了测定抗体滴度，使用针对H3K27me2的抗体（产品编号25241）进行ELISA实验，抗体进行梯度稀释。使用的抗原是含有目标组蛋白修饰的肽段。通过绘制吸光度与抗体稀释度的关系图，估计抗体的滴度为1:480,000。

交叉反应性测试

使用针对H3K27me2的抗体（产品编号25241）进行点杂交分析，测试其与其他修饰的组蛋白H3和H4肽段以及未修饰序列的交叉反应性。将含有相应组蛋白修饰的肽段（100至0.2 pmol）点在膜上，抗体稀释度为1:50,000。图3显示抗体对目标修饰具有高特异性。

Western Blot分析

使用针对H3K27me2的抗体（产品编号25241），对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析。抗体在含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween中稀释1:1000。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。

免疫荧光分析

HeLa细胞用针对H3K27me2的抗体（产品编号25241）和DAPI进行染色。细胞用4%甲醛固定10分钟，并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100进行封闭。细胞用H3K27me2抗体（左侧）在封闭液中稀释1:500进行免疫荧光标记，随后用与Alexa488偶联的抗兔抗体进行二抗标记。中间图显示了DAPI对细胞核的染色。右侧图显示了两种染色的合并图像。

应用

ChIP（2 ?g/ChIP）

ELISA（1:1000）

点杂交（1:50,000）

Western Blot（1:1000）

免疫荧光（1:500）

运输温度：-20°C或-80°C

物种反应性：人

备注：每次免疫沉淀的抗体优良用量应由终端用户确定。建议测试1 - 5 ?g/次。

注意事项：避免反复冻融。

科学分类：抗体

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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