
在这个实验中,样品中的血红蛋白(HPT)与吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗-HPT抗体发生反应。在洗涤去除未结合蛋白质之后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗-HPT抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的HPT形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过添加一种显色底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)来检测免疫吸附剂上的酶。结合酶的数量与样品中HPT的浓度成正比;因此,在450 nm处的吸光度是对测试样品中HPT浓度的测量。测试样品中的HPT量可以通过从标准品构建的标准曲线进行插值,并校正样品稀释来确定。
艾美捷牛触珠蛋白ELISA试剂盒(E-10HPT)组分:
试剂盒及其组分的过期日期已在盒子标签上注明。如果按照此试剂盒协议插入物的存储和使用,所有组分应在过期日期之前保持稳定。
牛触珠蛋白ELISA试剂盒预期用途:
HPT检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定(ELISA),用于测量牛生物样本中的HPT。如果ELISA将用于预期用途之外的用途,用户可能需要优化其用途。
程序限制
仅用于研究。不用于诊断目的。仅限体外使用。
只有在完全理解包装说明书中的信息并遵守良好实验室规范的情况下,才能获得可靠和可重复的结果。可能影响检测性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样品移液的准确性、洗涤技术、孵育时间或温度。不要混合或替换来自其他批次或来源的试剂。
需要但未提供的材料:
精密移液管(2微升至100微升)用于制备和分配稀释液
试管
喷瓶或微孔板洗涤器/抽吸器
蒸馏水或去离子水
微孔板阅读器
各种玻璃器皿用于制备试剂和缓冲溶液
用于样品收集的离心机
用于血浆收集的抗凝剂
计时器
牛触珠蛋白ELISA试剂盒所用样本采集和处理:
所有血液成分和生物材料都应视为潜在危险物质进行处理。在处理和处置时,请遵循通用预防措施。
如果血样凝结、明显溶血、脂质增多,或者样本完整性存在疑虑,请做好记录,并谨慎解读结果。
以下列出的样本收集和存储条件仅供参考。样本稳定性尚未评估。
血清样本:应通过静脉穿刺采集血液。在凝结后,应通过离心将血清与细胞分离。立即进行测定或将样本分装并存储在-80℃(合适)或-20℃。避免反复冻融循环。
血浆样本:血液应采集到含抗凝剂的容器中,然后进行离心。立即进行测定或将样本分装并存储在-80℃(合适)或-20℃。避免反复冻融循环。
尿液样本:使用无菌或清洁尿液收集器进行中段收集。离心去除细胞碎片。立即进行测定或将样本分装并存储在-80℃(合适)或-20℃。避免反复冻融循环。
已知干扰物质:浓度高于0.1%的偶氮化物和硫黄酸汞会抑制酶反应。