组蛋白H3上赖氨酸27的三甲基化（H3K27me3）与植物和动物发育及疾病过程中的转录抑制密切相关。这种修饰由多梳抑制复合体2（PRC2，由EZH2甲基转移酶催化）维持，并可通过赖氨酸去甲基化酶（如JMJD3）去除。

以小鼠为宿主制备的针对组蛋白H3在赖氨酸27位点三甲基化（H3K27me3）的单克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience销售产品Anti-H3K27me3单克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K27me3单克隆抗体：

同种型：IgG1

克隆性：单克隆

宿主物种/表达系统：小鼠

纯化方法：Protein A纯化

形式：水溶液

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS缓冲液

浓度：50 ?g/50 ?l

免疫原：合成肽

储存/稳定性

在-80°C下可保存长达2年。分装以避免反复冻融。分装后可在-20°C下保存至少一个月。

染色质免疫沉淀（ChIP）实验结果

使用针对H3K27me3的单克隆抗体（产品编号25243）和优化的qPCR引物组合，在人HeLa细胞中进行ChIP实验。实验使用了100万细胞的剪切染色质。抗体用量梯度为1、2、5和10 ?g/次ChIP实验，并进行了分析。以2 ?g/IP的IgG作为阴性免疫沉淀对照。定量PCR使用了活性基因c-fos和GAPDH的启动子引物作为阴性对照，以及非活性基因MYT1和TSH2B的编码区引物作为阳性对照。图1显示了回收率，以输入量的百分比表示（免疫沉淀DNA与输入DNA的相对量，经qPCR分析后得出）。这些结果与H3K27me3主要存在于非活性基因中的观察结果一致。

抗体的交叉反应性测试

为了测试特异性，使用针对H3K27me3的单克隆抗体（产品编号25243）进行ELISA实验，抗体进行梯度稀释。实验孔分别包被了含有未修饰的H3K27区域以及单甲基化、二甲基化和三甲基化H3K27以及三甲基化H3K9的肽段。图2显示抗体对目标修饰的肽段具有高特异性。

Western Blot分析

使用针对H3K27me3的单克隆抗体（产品编号25243），对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析。抗体在含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween中稀释1:1000。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。

免疫荧光分析

HeLa细胞用针对H3K27me3的抗体（产品编号25243）和DAPI进行染色。细胞用4%甲醛固定10分钟，并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100进行封闭。细胞用H3K27me3抗体（左侧）在封闭液中稀释1:500进行免疫荧光标记，随后用与Alexa594偶联的抗小鼠抗体进行二抗标记。中间图显示了DAPI对细胞核的染色。右侧图显示了两种染色的合并图像。

应用

ChIP（1 - 2 ?l/ChIP）

ELISA（1:3000）

Western Blot（1:1000）

免疫荧光（1:500）

运输温度：-20°C或-80°C

物种反应性：人

备注：每次免疫沉淀的抗体优良用量应由终端用户确定。建议测试1 - 5 ?g/次。

注意事项：避免反复冻融。

科学分类：抗体

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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