
阜平抗PDR 8| ABC转运蛋白G家族成员36
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PDR8蛋白是控制防御反应中细胞死亡程度的关键因素。替代名称:ABC转运蛋白ABCG.36、AtABCG36、多效耐药蛋白8、蛋白渗透3
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抗PDR 8| ABC转运蛋白G家族成员36 | AS22-4846 | 查看 |
抗PDR 8| ABC转运蛋白G家族成员36:
免疫原: 与KLH偶联的合成肽,来源于拟南芥PDR8,UniProt编号:Q9XIE2,TAIR编号:At1g59870
宿主: 兔
克隆性: 多克隆
纯度: 血清
形式: 冻干
数量: 50 ?l
复溶: 复溶时,加入50 ?l的无菌水.
保存: 冻干/复溶后保存于-20°C;复溶后分装以避免反复冻融。请记得在打开试管前短暂离心,以避免材料粘附在试管盖或侧壁而导致损失.
测试应用: Western blot (WB)
推荐稀释度: 1 : 10000 (WB)
预期 | 表观分子量: 165 | 150 kDa(拟南芥)
确认反应性: 拟南芥
预测反应性: 油菜、盐芥
不反应于: 小麦属植物
样品: 根据文献(1)从8天大的拟南芥幼苗中提取总蛋白(T)或微粒体蛋白组分(M/P100)。幼苗基因型包括Col-0(野生型)和PEN3-GFP/pen3-1,其中pen3-1为敲低突变体(2)。请注意,PEN3也被称为PDR8或ABCG36;PDR8/PEN3/ABCG36的预期表观分子量为165 kD,PDR8/PEN3-GFP为192 kD。37 ?g的蛋白在65°C下变性5分钟,然后在8% SDS-PAGE上分离,并通过槽式转移系统以50V转至硝酸纤维素膜(0.45 ?m)上70分钟。用PBS+0.1% Tween 20(PBS-T)+5%牛奶在室温下振荡封闭印迹1小时。用1:10000稀释的一抗αPDR8(Agrisera, AS22 4846)在PBS-T+5%牛奶中4°C下过夜孵育。倒掉一抗溶液,用PBS-T在室温下振荡洗涤五次,每次5分钟。然后用二抗山羊抗兔IgG H&L(Agrisera, AS09602)稀释至1:25000孵育1小时,并用PBS-T振荡洗涤四次,每次5分钟。用化学发光检测试剂显色,曝光时间为指示的秒数。总蛋白染色Ponceau S和针对细胞质MPK6的抗体作为上样对照.
实验验证
实验验证: 在本实验中,使用Col-0(野生型)和PEN3-GFP/pen3-1验证了PDR8蛋白的检测,其中pen3-1为敲低突变体。请注意,PEN3也被称为PDR8或ABCG36;PDR8/PEN3/ABCG36的预期表观分子量为165 kD,PEN3-GFP为192 kD.
致谢: 密苏里大学哥伦比亚分校生物化学系、跨学科植物小组(IPG)的Eric Fritschi、Nga Nguyen和Antje Heese提供
附加信息(应用): 蛋白或膜样品在上样前应在不超过65°C - 70°C的温度下处理10分钟.
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