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丰泽全能核酸酶应用程序、质量控制说明

分类:新闻中心 发布时间:1970-01-01 63次浏览

全能核酸酶(同Benzonase)制品经过基因工程改造重组表达获得,是由粘质沙雷...

全能核酸酶(同 Benzonase)制品经过基因工程改造重组表达获得,是由粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)分泌的、由两个大小为 26 kDa 的亚基组成的一种广谱核酸酶,又称非限制性核酸内切酶,其活力比 DNase I 强 34 倍,能以相同的效率酶切单链和双链 DNA 和 RNA,将其消化成 3~5 碱基长度(杂交限度以下)的 5'-单磷酸寡核苷酸。其发挥活性需要 Mg²⁺,合适活性 pH 范围为 6~10,合适反应温度为 37℃。

 

艾美全能核酸酶

Cat #: C-BSM2907

Size: 25 KU / 50 KU / 100 KU

Storage: -20°C

 

全能核酸酶组分:

71.png

酶活性定义:

一个单位(U)的活性被定义为在2.625 ml反应体系中,在37°C和pH 8.0的条件下,在30分钟的反应内引起A260吸收峰变化1.0所需的酶的量(相当于将37μg鲱鱼精子DNA完全消化为寡核苷酸)。

 

应用程序:

1.降解各种形式的DNA和RNA,使其成为在制备疫苗、抗体、细胞疗法和其他生物产品时去除核酸(DNA和RNA)污染的合适工具,以满足美国食品药品监督管理局的标准,即用于治疗的生物制药中核酸残留量不超过10 pg/剂。

2.通过降解核酸降低细胞裂解物的粘度,促进溶液过滤/超滤过程,缩短处理时间,提高病毒、AAV载体和来源于细胞的包涵体纯化过程中沉淀物和上清液的分离效率,提高色谱纯化效率,zui终提高产量和产品纯度。

3.在生物分析中的应用:可用于制备ELISA样品、色谱法、二维电泳(蛋白质图谱)和蛋白质印迹分析,以提高分辨率和样品回收率。

 

质量控制

蛋白质纯度检测:产品经SDS-PAGE测试,纯度≥95%。

蛋白酶残留检测:将产品与蛋白质底物在37°C下孵育16小时,并使用SDS-PAGE凝胶电泳检测底物。蛋白质底物应该没有显著变化。

内毒素残留检测:内毒素残留量<10 EU/ml

 

注意事项:

1. 使用RNA样品时,将其加入无RNase的试管中

2. 超级核酸酶(苯甲酸酶)的有效工作温度范围为0~42°C,合适工作温度为37°C。酶活性在低温下可能会降低,但这可以通过添加2至5倍于苯甲酸酶核酸酶的量或延长消化时间(2至3小时)来补偿。

3. 含有大量蛋白质、细胞壁或其他盐的粗产物可能部分抑制酶的活性。在这种情况下,有必要增加

4. 酶活性≥250U/μl。对于小体积制剂,在将酶加入系统之前,可将其在稀释缓冲液(20mM Tris-Cl pH 8.0,2mM MgCl2,2mM NaCl)中稀释至一定浓度。稀释后的溶液只能在4°C下储存几天

5. 该产物以液体形式提供,并且可以直接添加到裂解缓冲液中以供共同使用。

6. 为了您的安全和健康,请在实验过程中穿戴实验服、一次性手套和口罩。

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 

https://www.amyjet.com/products/C-BSM2907-25KU.shtml

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