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伊春快速内切酶DpnII,专为快速酶切而设计

分类:新闻中心 发布时间:1970-01-01 21次浏览

快速内切酶DpnII专为快速酶切而设计.5-15分钟即可完全酶切,让DNA酶切变...

快速内切酶DpnII专为快速酶切而设计.5-15分钟即可完全酶切,让DNA酶切变得简单。组分:FlyCut™ DpnII,10× CutOne™ Buffer,10× CutOne™ Color Buffer,保存建议-20℃

 

艾美捷快速内切酶DpnII

Cat #: C-BSM533

Size: 50 rxns

Storage: -20°C

 

快速内切酶DpnII使用方法:

1.快速DNA消化方案

①将以下反应组分按所示顺序在冰上混合:

51.png

a. 对于纯化的PCR产物。如果PCR产物未纯化,则应将10倍CutOne“”缓冲液的量减少到2μl,以减少未纯化PCR产物中的剩余金属离子。如果用于克隆,我们建议在消化前纯化PCR产物,因为一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能会改变切割DNA的末端。

②轻轻混合并向下旋转;

③ 在37°C下培养15分钟(质粒DNA)或15~30分钟(PCR产物)或30~60分钟(基因组

DNA);

④ 可选:80°C加热20分钟灭活酶;

⑤如果在反应中使用CutOne“”颜色缓冲液,则将反应混合物的等分试样直接加载在凝胶上。

2.DNA的双重和多重消化

① 使用每种酶1μl,并适当扩大反应条件;

② 反应混合物中酶的总体积不应超过总反应体积的1/10;③如果酶需要不同的反应温度,从需要较低温度的酶开始,然后加入第二种酶并在较高温度下孵育。

3.扩大质粒DNA消化反应

 

在推荐的反应条件下,该酶可在5~15分钟内消化单位底物。酶的极适反应温度为37°C。

当底物DNA被DAM甲基化酶甲基化时,这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

当底物DNA被EcoBI甲基化酶甲基化时,这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

该酶可以在80°C下孵育20分钟进行热灭活。孵育3小时不会显示星形活性,但孵育时间较长可能会导致星形活性。

 

https://www.amyjet.com/products/C-BSM533-50rxns.shtml

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