以兔为宿主制备的针对含有单甲基化赖氨酸36（H3K36me1）的组蛋白H3的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience销售产品Anti-H3K36me1多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K36me1多克隆抗体：

克隆性：多克隆

宿主物种/表达系统：兔

纯化方法：亲和纯化

形式：水溶液

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS缓冲液

浓度：50 ?g/54 ?l

免疫原：合成肽

储存/稳定性

在-80°C下可保存长达2年。分装以避免反复冻融。分装后可在-20°C下保存至少一个月。

染色质免疫沉淀（ChIP）实验结果

使用人骨肉瘤（U2OS）细胞、针对H3K36me1的抗体（产品编号25246）和优化的qPCR引物对进行ChIP实验。实验使用了150万细胞的剪切染色质，并采用严格的洗涤条件。抗体用量梯度为1、2、5和10 ?g/次ChIP实验，并进行了分析。以1 ?g/IP的IgG作为阴性免疫沉淀对照。定量PCR使用了组成性表达基因GAPDH的启动子引物和非活性基因MYOD的引物。

为了测定抗体滴度，使用针对H3K36me1的抗体（产品编号25246）、粗提血清和流穿液进行ELISA实验，抗体进行梯度稀释。使用的抗原是含有目标组蛋白修饰的肽段。通过绘制吸光度与抗体稀释度的关系图，估计抗体的滴度为1:46,000。

交叉反应性测试

使用针对H3K36me1的抗体（产品编号25246）进行点杂交分析，测试其与其他修饰的组蛋白H3肽段或未修饰的H3K36序列的交叉反应性。将含有相应组蛋白修饰的肽段（100至0.2 pmol）点在膜上，抗体稀释度为1:20,000。图3显示抗体对目标修饰具有高特异性。

Western Blot分析

使用针对H3K36me1的抗体（产品编号25246），对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析。抗体在含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween中稀释1:1000。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。

免疫荧光分析

人骨肉瘤（U2OS）细胞用针对H3K36me1的抗体（产品编号25246）和DAPI进行染色。细胞用4%甲醛固定20分钟，并用含有5%正常山羊血清的PBS/TX-100进行封闭。

图A：细胞用H3K36me1抗体（左侧）在封闭液中稀释1:500进行免疫荧光标记，随后用与Alexa568偶联的抗兔抗体进行二抗标记，或用DAPI（右侧）标记，特异性标记DNA。

图B、C、D和E：分别在抗体与含有未修饰的H3K36以及单甲基化、二甲基化和三甲基化H3K36的阻断肽孵育后，用H3K36me1抗体对细胞进行染色。

应用

ChIP（5 - 10 ?g）

ELISA（1:100）

点杂交（1:20,000）

Western Blot（1:1000）

免疫荧光（1:500）

运输温度：-20°C或-80°C

物种反应性：人

备注：每次免疫沉淀的抗体优良用量应由终端用户确定。建议测试5 - 10 ?g/次。

注意事项：避免反复冻融。

科学分类：抗体

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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