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阿鲁科尔沁CENP-E运动结构域蛋白(重组人)的用途及生物活性

分类:新闻中心 发布时间:1970-01-01 67次浏览

人类CENP-E(KIF10)的保守运动域在原核系统中表达。重组蛋白在氨基末端含...

人类CENP-E(KIF10)的保守运动域在原核系统中表达。重组蛋白在氨基末端含有GST标签,组合分子量为71 kDa。该蛋白在微管激活的ATP酶活性测试中已被确定为具有生物活性。蛋白质以白色冻干粉末形式提供。

 

艾美捷CENP-E运动结构域蛋白(重组人)的用途:

微管活化ATP酶活性的测定

鉴定/表征影响运动ATP酶活性的蛋白质或小分子

鉴定/表征影响驱动蛋白运动性的蛋白质或小分子

鉴定/表征影响运动/微管相互作用的蛋白质或小分子

 

蛋白质纯度:

是通过在12%聚丙烯酰胺凝胶上扫描考马斯蓝染色蛋白质的密度测定法确定的。所有驱动蛋白运动域的纯度均为>85%。有关纯度示例,请参见图1。

 

生物活性 - 微管活化的 ATP酶测定通过使用:

驱动蛋白ELIPA测定试剂盒(货号#BK060)监测实时游离磷酸盐的生成来测量CENP-E ATP酶活性。该测定基于330-氨基-360-巯基-2甲基嘌呤核糖核苷(MESG)在无机磷酸盐(Pi)存在下催化转化为6-氨基-7-巯基-2-甲基嘌呤时发生的吸光度偏移(6 nm - 7 nm)。一个Pi分子将在基本上不可逆的反应中产生一个分子的2氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤。因此,360nm处的吸光度与驱动蛋白ATP酶反应中产生的Pi量成正比。在下面概述的条件下,CENP-E 微管激活的 ATP 酶活性的 Vmax 为每毫克 CP900 每分钟产生的 >01 nmoles ATP(图 2)。使用10分钟终点测定(驱动蛋白ATP酶终点测定试剂盒,货#BK053)的ATP酶速率为每毫克CP900每分钟>01 nmoles ATP(数据未显示)。

图1:驱动蛋白运动域蛋白的纯度。BimC(BM01),CENP-E(CP01)和Eg5(EG01)在SDS-PAGE凝胶上运行,并用考马斯蓝染色。

图2:使用驱动蛋白ELIPA检测试剂盒(货号#BK060)的CENP-E微管激活ATP酶活性

 

https://www.amyjet.com/products/CP01-A.shtml

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