永安Anti-H3K27me3S28p多克隆抗体
产品详情
以兔为宿主制备的针对组蛋白H3在赖氨酸27位点三甲基化且丝氨酸28位点磷酸化（H3K27me3S28p）的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。
作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience销售产品Anti-H3K27me3S28p多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。
| 产品名称 | 货号 | 详情 |
Anti-H3K27me3S28p多克隆抗体 | BPS-25245 | 查看 |
Anti-H3K27me3S28p多克隆抗体：
克隆性：多克隆
宿主物种/表达系统：兔
纯化方法：亲和纯化
形式：水溶液
配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS缓冲液
浓度：50 ?g/295 ?l
免疫原：合成肽
储存/稳定性
在-80°C下可保存长达2年。分装以避免反复冻融。分装后可在-20°C下保存至少一个月。
染色质免疫沉淀（ChIP）实验结果
使用经秋水仙碱处理的人HeLa细胞、针对H3K27me3S28p的抗体（产品编号25245）和优化的qPCR引物组合进行ChIP实验。实验使用了100万细胞的剪切染色质。抗体用量梯度为1、2、5和10 ?g/次ChIP实验，并进行了分析。以2 ?g/IP的IgG作为阴性免疫沉淀对照。定量PCR使用了活性基因GAPDH的启动子引物作为阴性对照，以及非活性基因MYT1和TSH2B的编码区引物作为阳性对照。图1显示了回收率，以输入量的百分比表示（免疫沉淀DNA与输入DNA的相对量，经qPCR分析后得出）。这些结果与H3K27me3S28p主要存在于非活性基因中的观察结果一致。
ChIP-seq实验结果
使用2 ?g针对H3K27me3S28p的抗体（产品编号25245），在150万经秋水仙碱处理的HeLaS3细胞的剪切染色质上进行ChIP实验。随后，免疫沉淀的DNA在Illumina HiSeq测序仪上进行分析。文库制备、簇生成和测序均按照制造商说明进行。51 bp的标签通过BWA算法与人类基因组比对。图2显示了围绕TSH2B和MYT1阳性对照基因（图2A和B，箭头所示）以及染色体3和20（图2C和D）的基因组区域的富集情况。
抗体滴度测定
为了测定抗体滴度，使用针对H3K27me3S28p的抗体（产品编号25245）进行ELISA实验，抗体进行梯度稀释。使用的抗原是含有目标组蛋白修饰的肽段。通过绘制吸光度与抗体稀释度的关系图（图2），估计抗体的滴度为1:4,300。
交叉反应性测试
使用针对H3K27me3S28p的抗体（产品编号25245）进行点杂交分析，测试其与其他修饰的组蛋白H3和H4肽段以及未修饰的H3K27S28序列的交叉反应性。将含有相应组蛋白修饰的肽段（100至0.2 pmol）点在膜上，抗体稀释度为1:2,000。图3显示抗体对目标修饰具有高特异性。
Western Blot分析
A. 使用针对H3K27me3S28p的抗体（产品编号25245），对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g，泳道1）和1 ?g重组组蛋白H3（泳道2）进行Western Blot分析。抗体在含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween中稀释1:100。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。
B. 使用针对H3K27me3S28p的抗体进行细胞周期实验。对处于细胞周期不同阶段的细胞进行Western Blot分析（1=非同步群体，2=G1/Sa，3=G1/Sb，4=S期，5=G2/M，6=M期，7=G1期）。图片显示在有丝分裂期间H3K27me3S28p表达的显著峰值。
应用
ChIP/ChIP-seq（1 - 2 ?g/ChIP）
ELISA（1:200）
点杂交（1:2000）
Western Blot（1:1000）
运输温度：-20°C或-80°C
物种反应性：人
交叉反应性：特异性识别H3K27me3S28p。不与H3K9me3、H3K27me（1、2或3）、H3S10p、H3S28p或H3S28un发生交叉反应。在高浓度下与H3K9me3S10p有轻微交叉反应。
备注：每次免疫沉淀的抗体优良用量应由终端用户确定。建议测试1 - 5 ?g/次。
注意事项：避免反复冻融。
科学分类：抗体
监管状态：仅限研究使用
BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
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