
交叉反应测试:与 hACTH(交叉反应率 < 0.1%)、hAVP(<0.05%)无显著结合,证实仅靶向 CRF/CRH 家族;
种属特异性验证:在 CRF 基因敲除小鼠(Crf⁻/⁻)脑组织中检测不到信号,阳性对照野生型小鼠显示强阳性染色;
批次稳定性:采用标准化多肽免疫与纯化流程,不同批次间抗体效价变异系数(CV)≤7%,确保跨实验数据一致性。
中枢定位研究:通过 IHC 检测小鼠海马、前额叶皮层的 CRF 神经元分布,发现慢性应激模型中杏仁核 CRF 阳性细胞数增加 35%(p<0.01,BMA 内部数据);
外周机制探索:WB 检测大鼠肾上腺组织 CRF 受体(CRFR1)与 CRF 的共表达,揭示应激诱导的肾上腺皮质激素过量分泌通路。
体外细胞模型:ELISA 检测人 PBMC 经 IL-6 刺激后 CRH 分泌量,发现 CRH 可抑制 TNF-α 产生(抑制率达 40%,引用《Nature Immunology》2022 研究);
体内炎症模型:IF 共染显示,小鼠结肠炎病灶中 CRF 与 F4/80⁺巨噬细胞的共定位率达 65%,提示 CRF 参与调控肠道免疫微环境。
代谢综合征:检测肥胖小鼠下丘脑 CRF 水平,发现与瘦素抵抗呈正相关(r=0.78);
神经退行性疾病:在 AD 转基因小鼠中,CRF 过度表达加速 Aβ 沉积,IHC 显示海马区 CRF 阳性纤维与 Aβ 斑块共定位;
药物研发:评估 CRFR1 拮抗剂治疗效果,通过 WB 检测给药后小鼠垂体 CRF 前体蛋白表达量下降 50%,验证靶点抑制效率。
现货供应:常备 100 μl/500 μl 规格,48 小时内全国发货,支持紧急订单优先处理;
技术支持矩阵:
样本预处理指南:针对血清 / 血浆样本,提供 PEG 沉淀法去除干扰蛋白方案;
实验优化服务:协助解决 IHC 背景过高问题(如推荐 0.3% Triton X-100 透化 + 5% 正常兔血清封闭组合);
文献支持:提供该抗体在 C57BL/6 小鼠、SH-SY5Y 细胞等人鼠模型中的经典应用案例。
样本处理:
脑组织 / 垂体组织提取:建议使用含蛋白酶抑制剂(PMSF 1 mM、Leupeptin 1 μg/ml)的 RIPA 裂解液,冰上匀浆后 12,000g 离心 30 分钟取上清;
血清 / 血浆样本:避免反复冻融,推荐使用 EDTA 抗凝管采集,离心后分装 - 80℃保存,检测前需进行 1:100 预稀释以减少内源性抗体干扰。
检测方法优化:
WB 显影:推荐使用 ECL Plus 试剂盒,曝光时间控制在 1-5 分钟,避免过曝导致非特异性条带;
IHC 染色:针对大鼠垂体等富含 CRF 的组织,建议采用梯度乙醇脱水(50%-),防止抗原过度流失;荧光染色时搭配 DAPI 核染,提升细胞定位准确性。
阴性对照设置:
空白对照:以 PBS 替代一抗,排除二抗非特异性结合;
抗原阻断对照:将抗体与过量 CRF 多肽(10 μg/ml)预孵育 1 小时,确认目标条带 / 染色信号消失,验证特异性。
项目 | 指标 |
货号 | T-4037 |
抗体类型 | 兔源多克隆抗体(IgG) |
免疫原 | 人 CRH(1-41)合成多肽(偶联 KLH) |
反应物种 | 人、小鼠、大鼠 |
检测靶点 | CRF/CRH(成熟肽及前体蛋白) |
应用范围 | WB/IHC/ELISA/IF |
储存条件 | -20℃(分装后避免反复冻融) |
有效期 | 5 年(未开封) |