一、补体系统与 TCC 的生物学意义

补体系统是先天性免疫的核心组成部分，通过经典、凝集素和替代三条途径激活，最终形成末端补体复合物（TCC，又称 SC5b-9 或膜攻击复合物 MAC）。TCC 的形成标志着补体系统的终末活化阶段，其在病原体清除、细胞裂解及炎症调控中发挥关键作用。作为补体活化的直接产物，TCC 水平可反映体内免疫反应强度，是评估感染性疾病、自身免疫性疾病及器官损伤的重要生物标志物。

二、Hycult TCC ELISA 试剂盒的核心技术参数

（一）产品基本信息

• 货号：HK328

• 购买渠道：艾美捷科技

• 检测范围：8.2-2000 mAU/mL（线性范围）

• 灵敏度：8.2 mAU/mL（更低检测限）

• 样本类型：人血浆、尿液、脑脊液、关节液及细胞培养上清液

• 交叉反应性：与食蟹猴、猪、兔样本兼容，与马、小鼠、大鼠无交叉反应

（二）性能验证数据

1. 线性验证：通过系列稀释含 250 mAU/mL TCC 的样本，获得斜率 0.967、相关系数 R²=0.999 的标准曲线，显示优异的线性关系。

2. 回收率测试：在人血浆中添加 2500 和 250 mAU/mL TCC 标准品，回收率范围 128%-153%（均值 140%），证明检测准确性。

3. 稳定性：试剂盒在 4℃储存条件下至少稳定 6 个月，确保长期实验可靠性。

三、检测原理与技术优势

（一）三明治 ELISA 技术

试剂盒采用双抗体夹心法，通过包被于固相载体的抗 TCC 捕获抗体结合样本中的 TCC，再依次加入生物素化检测抗体、链霉亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）复合物，最终通过 TMB 底物显色反应实现定量检测。该方法特异性识别 TCC 中的新抗原表位，避免与游离补体成分的干扰，确保检测结果的准确性。

（二）技术优势解析

1. 高灵敏度：检测下限达 8.2 mAU/mL，可有效区分健康人群与疾病状态下的 TCC 水平差异。

2. 样本兼容性广：支持多种体液类型检测，尤其适用于脑脊液、关节液等微量样本的分析，为神经系统疾病、自身免疫性关节炎等研究提供便利。

3. 操作高效性：3.5 小时内完成检测流程，96 孔板设计支持灵活批量检测，适配高通量实验需求。

4. 质量控制完善：包含预包被板条、即用型试剂及标准品，减少实验误差，确保结果重复性。

四、应用领域与研究价值

（一）疾病诊断与监测

1. 感染性疾病：在脓毒症、脑膜炎等感染模型中，TCC 水平升高与疾病严重程度正相关，可作为预后评估指标。

2. 自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮（SLE）、抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎（AAV）患者血清 TCC 显著升高，辅助诊断与治疗监测。

3. 器官损伤评估：在肾脏移植排斥反应、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）中，TCC 水平可反映补体介导的组织损伤程度。

（二）基础研究应用

1. 补体激活机制研究：通过检测 TCC 生成量，解析不同激活途径的贡献度及调控机制。

2. 药物研发评价：评估补体抑制剂（如依库珠单抗）的药效，监测治疗过程中补体活化状态的动态变化。

五、实验操作指南与注意事项

（一）操作流程概述

1. 样本预处理：血浆样本需用 EDTA 或枸橼酸钠抗凝，避免使用肝素；脑脊液、关节液等需离心去除细胞碎片。

2. 加样与孵育：将标准品、样本及生物素化抗体依次加入预包被板，37℃孵育 1 小时，随后加入 HRP 复合物孵育 30 分钟。

3. 显色与检测：TMB 底物避光显色 15-20 分钟后，用草酸终止反应，酶标仪检测 450 nm 吸光度。

（二）关键注意事项

1. 样本处理：避免反复冻融，溶血样本可能干扰检测结果。

2. 温育条件：严格控制孵育温度与时间，确保抗体 - 抗原反应充分。

3. 洗涤步骤：使用试剂盒配套洗液，每次洗涤后彻底拍干，减少非特异性结合。

4. 安全防护：底物 TMB 具有潜在致癌性，终止液草酸需避免接触皮肤与黏膜。

六、总结与展望

Hycult 人末端补体复合物（TCC）ELISA 试剂盒通过精准的双抗体夹心技术，为补体活化研究提供了可靠的定量工具。其广泛的样本兼容性、高灵敏度及操作便捷性，使其在感染性疾病、自身免疫性疾病及器官损伤研究中具有重要应用价值。未来，随着补体靶向药物的不断发展，该试剂盒将在临床前药效评估及个体化治疗监测中发挥更大作用。

参考文献

1. Hycult Biotech. Human Terminal Complement Complex (TCC) ELISA Kit Product Manual. 2025.

2. Roitt IM, Brostoff J, Male DK. Immunology. 8th ed. London: Churchill Livingstone, 2014.

3. Volanakis JE, Frank MM. The Human Complement System in Health and Disease. 2nd ed. New York: Marcel Dekker, 2001.