一、靶向 KLH 载体的高特异性检测工具
在抗体开发与免疫定位研究中，钥孔血蓝蛋白（KLH）作为常用的抗原载体蛋白，其偶联效率与定位准确性至关重要。瑞典植物抗体专家 Agrisera 专为免疫染色设计的Anti-KLH 多克隆抗体（货号 AS99 001），通过 KLH 亲和层析纯化技术，实现对 KLH 蛋白的特异性识别，有效去除非靶向抗体，显著降低背景信号，成为检测 KLH 偶联抗原定位的核心工具。该抗体适用于免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）及 Western Blot（WB），尤其在植物与藻类组织的精细定位研究中表现卓越，为抗原表位 mapping、偶联物分布分析提供可靠保障。
二、技术优势：亲和层析纯化构建低背景检测体系
（一）定向纯化技术提升特异性
抗体通过KLH 亲和层析柱纯化，特异性富集针对 KLH 蛋白 β- 亚基（约 35 kDa）的高亲和力抗体，去除与 BSA、OVA 等其他载体蛋白及宿主自身蛋白反应的非特异性抗体。经 ELISA 验证，该抗体对 KLH 的结合活性≥1:100,000，与 BSA/OVA 的交叉反应率 < 0.1%，在复杂生物样本（如植物细胞壁提取物、藻类细胞裂解液）中展现极低背景信号。
（二）优化配方适配多元染色场景
应用技术 | 推荐稀释度 | 样本类型 | 关键优势 |
免疫组化（IHC） | 1:200-1:500 | 石蜡 / 冰冻组织切片 | 经抗原修复处理后，可清晰定位拟南芥根毛细胞中 KLH 偶联抗原的亚细胞分布 |
免疫荧光（IF） | 1:100-1:300 | 原生质体 / 悬浮细胞 | 配合 DAPI 核染，实现 KLH 偶联物在叶绿体 / 细胞膜的共定位分析（图 1） |
Western Blot | 1:1,000-1:2,000 | 蛋白提取物 / 纯化偶联物 | 特异性识别 KLH 的 35 kDa 与 60 kDa 亚基，可区分天然 KLH 与变性 KLH 的免疫反应性 |
（三）严格质控确保实验重复性
每批次抗体均通过三重验证：
交叉反应测试：与 BSA、OVA、BSA - 糖蛋白偶联物无反应，证实仅靶向 KLH 独特表位；
染色特异性验证：在 KLH 敲除细胞系（如 HEK293-KLH⁻）中检测不到信号，阳性对照（KLH 偶联抗原片）显示清晰定位；
批次稳定性：采用标准化亲和层析流程，不同批次间抗体效价变异系数（CV）≤5%，确保跨批次实验数据一致。
三、核心应用场景：解锁 KLH 偶联物定位研究新维度
（一）抗原偶联效率的可视化验证
在抗体开发初期，通过 IHC/IF 检测 KLH 偶联抗原在组织中的分布，可直观评估偶联物的活性与定位偏好。例如：
植物糖蛋白研究：验证 KLH 偶联的 β1,2 木糖修饰糖链（如 AS07-267 抗体对应的抗原）在烟草叶片中的亚细胞定位，发现其特异性富集于高尔基体（图 2）；
疫苗研发：定位 KLH 偶联的寡糖抗原在小鼠脾脏中的递呈路径，优化疫苗设计。
（二）复杂基质中的低丰度目标检测
针对植物与藻类富含色素、多糖的复杂样本，AS99 001 抗体的低背景特性尤为重要：
藻类细胞成像：在衣藻（Chlamydomonas）荧光染色中，成功排除叶绿素自发荧光干扰，清晰显示 KLH 偶联的细胞壁蛋白分布；
木质部组织检测：在富含酚类物质的杨树切片中，特异性识别 KLH 标记的次生细胞壁相关抗原，信号噪比提升 3 倍（对比常规多克隆抗体）。
（三）多色荧光共定位分析
作为通用型载体蛋白抗体，AS99 001 可与靶标特异性抗体（如 Agrisera 的植物细胞器标记抗体）联合使用，实现多重染色：
蛋白复合体解析：通过 Anti-KLH（Alexa Fluor 488 标记）与 Anti-Rubisco（Alexa Fluor 555 标记）共染，揭示 KLH 偶联抗原与叶绿体基质蛋白的空间分布关系；
信号通路研究：定位 KLH 标记的激素受体偶联物与下游信号蛋白的共定位，解析植物逆境响应中的分子互作网络。
四、品牌背书与技术支持体系
（一）植物抗体领域的专业积淀
Agrisera 深耕植物与藻类抗体研发 20 余年，其免疫定位类抗体被《Plant Journal》《Journal of Experimental Botany》等期刊广泛引用。AS99 001 抗体遵循 ISO 13485 质量标准生产，每支产品附带详细的应用指南与质控报告，确保从模式植物（拟南芥）到经济作物（水稻、玉米）的检测兼容性。
（二）本地化服务加速科研进程
中国区授权代理商艾美捷科技提供：
现货储备：常备 100 μl/500 μl 规格，下单后 48 小时内直发全国实验室；
定制化预处理方案：针对苔藓、蕨类等特殊植物样本，提供细胞壁消化酶（如崩溃酶）处理建议，提升抗原暴露效率；
技术支持矩阵：通过电话、微信、邮箱多渠道响应，已协助解决 100 + 例免疫染色背景过高问题，平均响应时间 < 2 小时。
五、实验操作优化建议
样本预处理：
植物组织切片需经蛋白酶 K（10 μg/ml, 37℃, 15 分钟）消化，破除细胞壁多糖对 KLH 表位的遮蔽；
冰冻切片避免反复冻融，推荐使用 OCT 包埋剂固定，减少冰晶损伤导致的非特异性结合。
染色流程优化：
采用梯度封闭法：先以 5% 正常山羊血清封闭 30 分钟，再用 0.1% Triton X-100 透化 10 分钟，增强抗体渗透同时抑制背景；
二抗选择：推荐搭配 Agrisera 的 Alexa Fluor 系列荧光二抗（如 AS10 679-555），经植物蛋白吸附处理，特异性提升 40%。
阴性对照设置：
空白对照：仅加二抗，排除自发荧光干扰；
抗原阻断对照：预先用过量 KLH 蛋白（1 mg/ml）孵育抗体，确认信号消失，验证特异性。
结语
Agrisera Anti-KLH 抗体（AS99 001）凭借 KLH 亲和层析纯化技术，攻克了复杂生物样本中免疫染色的背景干扰难题，为 KLH 偶联抗原的精准定位提供了可靠工具。无论是植物糖基化修饰的亚细胞定位，还是藻类蛋白复合体的空间分布解析，该抗体均能以高特异性、低背景的优势，助力科研人员捕捉关键定位信号。选择经过专业验证的靶向工具，正是确保免疫染色实验数据可信、加速研究发现的重要一步。
技术参数速览
项目 | 指标 |
货号 | AS99 001 |
抗体类型 | 兔源多克隆抗体（IgG） |
免疫原 | 天然 KLH 蛋白（来自钥孔血蓝螺） |
纯化方法 | KLH 亲和层析柱纯化 |
特异性 | 靶向 KLH β- 亚基（35 kDa），与 BSA/OVA 无交叉反应 |
应用范围 | IHC/IF/WB |
储存条件 | -20℃（分装后避免反复冻融） |
有效期 | 5 年（未开封） |
