
快速模式:室温 2 小时完成初级抗体反应,全程操作时间压缩至 5 小时,适合批量样本处理;
温和模式:4℃过夜孵育(16-20 小时),提升低浓度样本的捕获效率,适用于珍贵临床样本检测。配套的即用型 HRP 标记二抗与预包被微孔板,减少试剂配制步骤,配合标准化的 TMB 显色 - 终止流程,显著降低实验操作误差。
分析性能验证:板内变异系数(CV)≤8%,板间 CV≤10%,线性回归拟合度 R²≥0.995;
基质效应测试:在脑脊液基质中添加 0.1% BSA 作为保护剂,回收率控制在 90%-110%;
干扰物质检测:证实类风湿因子(RF<200 IU/ml)、高浓度 IgG(<50 mg/ml)及常见抗凝剂(EDTA、肝素)不影响检测结果。
分泌机制:检测 APP 剪切酶(β-Secretase、γ-Secretase)活性变化对 Aβ1-40 生成的影响,如 GSK-3β 抑制剂处理可使 SH-SY5Y 细胞上清 Aβ1-40 浓度下降 35%(p<0.05);
聚集特性:研究 Aβ1-40 与 Aβ1-42 的共聚集效应,发现两者摩尔比 > 10:1 时更易形成可溶性寡聚体(引用《Journal of Neuroscience》2023 年研究);
清除通路:评估 LRP-1、RAGE 等受体介导的 Aβ1-40 清除效率,为血脑屏障药物开发提供数据支持。
β-Secretase 抑制剂:如 Verubecestat 治疗 3 个月后,CSF Aβ1-40 浓度平均下降 45%,与 PET 显示的皮层淀粉样蛋白负荷减少呈正相关(r=0.72);
免疫治疗药物:Aβ 抗体药物可通过促进 Aβ1-40 的外周清除,使 CSF 中 Aβ1-40/Aβ1-42 比值恢复接近健康人水平。
样本处理方案:针对脑脊液冻融损伤,提供含蛋白酶抑制剂(AEBSF、Leupeptin)的专用保存液配方;
实验优化服务:根据客户需求定制预实验方案,解决高背景、低信号等常见问题;
合规性保障:严格遵循 ISO 13485 质量体系,提供完整的 COA 文件与第三方验证报告。
样本要求:
脑脊液样本需在采集后 1 小时内完成离心(1500g,10 分钟),分装至无热源 EP 管,-80℃冻存不超过 6 个月,避免反复冻融(每次冻融可导致 Aβ1-40 降解约 5%-8%);
脑组织提取物需使用含 7M 尿素的裂解缓冲液,超声破碎后离心取上清,蛋白浓度需控制在 2-5 mg/ml。
干扰控制:
生物素标记试剂使用者需在样本稀释时加入生物素阻断剂(试剂盒自备),避免高生物素血症(>10 ng/ml)导致的假阳性;
溶血样本(Hb>500 mg/dl)可能因血红蛋白氧化产物影响显色,建议剔除。
结果解读:试剂盒仅用于科研用途(RUO),临床诊断需结合 Aβ1-42、p-Tau 等多标志物联合分析,建议参考最新版《阿尔茨海默病生物标志物检测专家共识》。
检测指标 | Aβ1-40 |
货号 | RE59651 |
检测原理 | 双抗体夹心 ELISA |
样本类型 | CSF、脑组织匀浆、细胞上清 |
检测范围 | 20-2000 pg/ml |
灵敏度 | 8.3 pg/ml(S/CO=2) |
特异性 | Aβ1-40 识别率 ,Aβ1-42 交叉≤0.5% |
孵育时间 | 快速法 5 小时 / 过夜法 18 小时 |
储存条件 | 2-8℃(有效期 12 个月) |