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湖北细胞培养用HyStem透明质酸3D水凝胶套装使用说明

分类:新闻中心 发布时间:1970-01-01 78次浏览

HyStem硫醇修饰透明质酸12.5 mL套件基于交联巯基修饰透明质酸技术。透明...

HyStem 硫醇修饰透明质酸 12.5 mL 套件基于交联巯基修饰透明质酸技术。透明质酸是自然存在于结缔组织、上皮组织和神经组织细胞外基质中的成分。通过HyStem®,研究人员可以创建可定制的3D水凝胶,用于培养在其天然环境中富含透明质酸的细胞。

 

艾美捷细胞培养用HyStem透明质酸3D水凝胶套装(ABM-GS1004F)包括:

- Glycosil®(巯基修饰透明质酸)

- Extralink®-Lite(PEGDA,聚乙二醇双丙烯酸酯)

- 重组缓冲液(PBS)Hystem®套装组分混合后形成透明水凝胶。

 

细胞附着HyStem®水凝胶系统提供具有可变刚度的粘弹性基质,支持干细胞的扩增(迄今已对人类胚胎干细胞、CD34+细胞和肝细胞祖细胞进行了测试)。HyStem®水凝胶不支持表面细胞附着。细胞必须被封装在水凝胶中。细胞外基质(ECM)蛋白或肽可以在交联前与Glycosil混合,以提供附着信号并允许细胞附着在水凝胶表面。然而,添加的ECM蛋白类型取决于细胞类型和所需结果(扩增而无分化或伴有分化)。

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存储说明:

Glycosil:在-20°C条件下储存,可保存一年。重组后的溶液必须在同使用,不能重新冷冻。

Extralink-Lite:在-20°C条件下储存,可保存一年。重组后的溶液可在-20°C条件下保存一个月。

重组缓冲液:在4°C或室温条件下储存,可保存一年。

HyStem透明质酸3D水凝胶套装使用说明:

Glycosil和Extralink-Lite溶液通过用重组缓冲液溶解冻干固体来制备。重组后,Glycosil和Extralink-Lite将在pH约为7.4的1X磷酸缓冲盐溶液(PBS)中。按照说明重组后,套装将能够产生2.5、7.5或12.5毫升的材料以形成3D水凝胶。

1)让套装组分回到室温,静置1小时。

2)使用注射器和针头,用重组缓冲液重组套装组分。如果在重组过程中取下瓶塞,请尽量减少暴露在氧气中,以避免潜在的自交联。请按照下面的重组图表操作。

3) 在加入重组缓冲液后,立即对每个瓶进行几秒钟的涡旋。将瓶水平放在摇床或摇床上。每隔15分钟快速涡旋样品。有些组分可能需要超过2小时才能完全溶解。加热至37°C并轻轻涡旋将加速溶解。组分将变清晰并略带黏稠。

4) 当以1:4体积比向Glycosil中加入Extralink-Lite时,将形成3D水凝胶。1. - 对于2.5毫升和7.5毫升套装:0.25毫升Extralink-Lite对应1.0毫升Glycosil,用于2.5毫升和7.5毫升套装- 对于12.5毫升套装:2.5毫升Extralink-Lite对应10.0毫升Glycosil2. 用移液管混合。3. 如果要封装细胞,在加入Extralink-Lite之前将细胞沉淀重悬于Glycosil溶液中。来回移液管混合。4. 将所有组分混合后,等待5分钟,然后再次用移液管混合以确保细胞均匀分布。

5) 将HyStem分装到所需的孔板中。凝胶化将在约15分钟内开始,并在约90分钟内完全凝胶化。

 

https://www.amyjet.com/products/ABM-GS1004F.shtml

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