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安顺BMA CRF/CRH 多克隆抗体助力跨学科研究

分类:新闻中心 发布时间:2025-05-09 80次浏览

一、靶向核心应激调节因子的多物种通用工具促肾上腺皮质激素释放因子(CRF,Cor...

一、靶向核心应激调节因子的多物种通用工具
促肾上腺皮质激素释放因子(CRF,Corticotropin-Releasing Factor)及其人类同源物 CRH(Corticotropin-Releasing Hormone)是调控机体应激反应、神经内分泌及免疫平衡的关键分子。BMA Biomedicals 研发CRF/CRH 多克隆一抗(货号 T-4037),以高亲和力特异性识别 CRF/CRH 多肽,覆盖人、小鼠、大鼠等多种属,适用于 Western Blot(WB)、免疫组化(IHC)、ELISA 及免疫荧光(IF)等多元检测场景,成为解析 HPA 轴(下丘脑 - 垂体 - 肾上腺轴)功能、应激相关疾病机制及免疫调节网络的核心工具。
二、技术优势:多表位识别与跨物种反应性的双重保障
(一)高特异性抗原设计与亲和纯化
抗体以 ** 人工合成的 CRF 全序列多肽(1-41 氨基酸,人源序列)** 免疫新西兰白兔制备,经 CRF 多肽亲和层析柱纯化,特异性富集针对 CRF/CRH 保守表位的抗体,去除与 ACTH、AVP 等同源激素的交叉反应。ELISA 验证显示,该抗体对人 CRH(hCRH)、小鼠 CRF(mCRF)、大鼠 CRF(rCRF)的结合活性均≥1:50,000,与 hCRH(1-41)的亲和力常数(KD)达 2.3×10⁻¹⁰ M,确保在复杂生物基质中精准捕获目标分子。
(二)广谱种属反应性与多元应用适配
应用技术
推荐稀释度
检测样本类型
种属验证案例
Western Blot
1:500-1:2,000
组织 / 细胞裂解液、血清
可清晰检测人垂体瘤组织(50 kDa 前体蛋白)、小鼠下丘脑提取物(10 kDa 成熟肽)
免疫组化
1:200-1:500
石蜡 / 冰冻组织切片
在大鼠杏仁核神经元中定位 CRF 阳性细胞,经抗原阻断实验证实信号特异性(图 1)
ELISA
1:10,000-1:50,000
细胞培养上清、血浆
定量检测 LPS 刺激的人外周血单核细胞培养上清中 CRH 分泌量,检测下限达 12 pg/ml
(三)严格质控确保数据可靠性
每批次抗体均通过三重验证:
  1. 交叉反应测试:与 hACTH(交叉反应率 < 0.1%)、hAVP(<0.05%)无显著结合,证实仅靶向 CRF/CRH 家族;

  1. 种属特异性验证:在 CRF 基因敲除小鼠(Crf⁻/⁻)脑组织中检测不到信号,阳性对照野生型小鼠显示强阳性染色;

  1. 批次稳定性:采用标准化多肽免疫与纯化流程,不同批次间抗体效价变异系数(CV)≤7%,确保跨实验数据一致性。

三、核心应用场景:解锁应激相关研究的三大维度
(一)神经内分泌调控:HPA 轴功能解析
CRF/CRH 作为 HPA 轴的启动因子,其异常表达与焦虑、抑郁、创伤后应激障碍(PTSD)密切相关:
  • 中枢定位研究:通过 IHC 检测小鼠海马、前额叶皮层的 CRF 神经元分布,发现慢性应激模型中杏仁核 CRF 阳性细胞数增加 35%(p<0.01,BMA 内部数据);

  • 外周机制探索:WB 检测大鼠肾上腺组织 CRF 受体(CRFR1)与 CRF 的共表达,揭示应激诱导的肾上腺皮质激素过量分泌通路。

(二)免疫调节:炎症反应与应激的交互作用
CRF/CRH 在免疫细胞(T 细胞、巨噬细胞)中兼具促炎与抗炎双重功能:
  • 体外细胞模型:ELISA 检测人 PBMC 经 IL-6 刺激后 CRH 分泌量,发现 CRH 可抑制 TNF-α 产生(抑制率达 40%,引用《Nature Immunology》2022 研究);

  • 体内炎症模型:IF 共染显示,小鼠结肠炎病灶中 CRF 与 F4/80⁺巨噬细胞的共定位率达 65%,提示 CRF 参与调控肠道免疫微环境。

(三)疾病机制研究:从基础到转化的桥梁
该抗体适用于多种疾病模型的分子机制解析:
  • 代谢综合征:检测肥胖小鼠下丘脑 CRF 水平,发现与瘦素抵抗呈正相关(r=0.78);

  • 神经退行性疾病:在 AD 转基因小鼠中,CRF 过度表达加速 Aβ 沉积,IHC 显示海马区 CRF 阳性纤维与 Aβ 斑块共定位;

  • 药物研发:评估 CRFR1 拮抗剂治疗效果,通过 WB 检测给药后小鼠垂体 CRF 前体蛋白表达量下降 50%,验证靶点抑制效率。

四、品牌背书与科研服务支持
(一)专业品牌的全球化验证
BMA Biomedicals 作为神经内分泌领域的标杆品牌,其 CRF 相关产品被引用至《Endocrinology》《Journal of Neuroscience》等期刊超 800 次。T-4037 抗体遵循 ISO 13485 质量体系生产,每支产品附带详细 COA 文件(含免疫原序列、效价数据及种属反应性表),确保从模式动物到临床样本的检测可靠性。
(二)本地化服务加速科研进程
中国区授权代理商艾美捷科技提供:
  • 现货供应:常备 100 μl/500 μl 规格,48 小时内全国发货,支持紧急订单优先处理;

  • 技术支持矩阵

  • 样本预处理指南:针对血清 / 血浆样本,提供 PEG 沉淀法去除干扰蛋白方案;

  • 实验优化服务:协助解决 IHC 背景过高问题(如推荐 0.3% Triton X-100 透化 + 5% 正常兔血清封闭组合);

  • 文献支持:提供该抗体在 C57BL/6 小鼠、SH-SY5Y 细胞等人鼠模型中的经典应用案例。

五、实验操作规范与注意事项
  1. 样本处理

  • 脑组织 / 垂体组织提取:建议使用含蛋白酶抑制剂(PMSF 1 mM、Leupeptin 1 μg/ml)的 RIPA 裂解液,冰上匀浆后 12,000g 离心 30 分钟取上清;

  • 血清 / 血浆样本:避免反复冻融,推荐使用 EDTA 抗凝管采集,离心后分装 - 80℃保存,检测前需进行 1:100 预稀释以减少内源性抗体干扰。

  1. 检测方法优化

  • WB 显影:推荐使用 ECL Plus 试剂盒,曝光时间控制在 1-5 分钟,避免过曝导致非特异性条带;

  • IHC 染色:针对大鼠垂体等富含 CRF 的组织,建议采用梯度乙醇脱水(50%-),防止抗原过度流失;荧光染色时搭配 DAPI 核染,提升细胞定位准确性。

  1. 阴性对照设置

  • 空白对照:以 PBS 替代一抗,排除二抗非特异性结合;

  • 抗原阻断对照:将抗体与过量 CRF 多肽(10 μg/ml)预孵育 1 小时,确认目标条带 / 染色信号消失,验证特异性。

结语
BMA Biomedicals CRF/CRH 多克隆抗体(T-4037)凭借多表位识别能力、广谱种属反应性及低背景特性,成为连接神经内分泌、免疫学与疾病机制研究的关键工具。在应激相关疾病发病率逐年上升的当下,精准检测 CRF/CRH 的时空表达,将为揭示 HPA 轴异常激活的分子机制、开发新型干预靶点提供坚实的数据支撑。选择经过国际认证的高品质抗体,正是确保实验结果可靠、加速科研发现的重要一步。
技术参数速览
项目
指标
货号
T-4037
抗体类型
兔源多克隆抗体(IgG)
免疫原
人 CRH(1-41)合成多肽(偶联 KLH)
反应物种
人、小鼠、大鼠
检测靶点
CRF/CRH(成熟肽及前体蛋白)
应用范围
WB/IHC/ELISA/IF
储存条件
-20℃(分装后避免反复冻融)
有效期
5 年(未开封)

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